颈动脉球囊扩张再狭窄动物模型
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(1)复制方法 对于3个月龄的雄性新西兰兔,首先采用常规麻醉进行仰卧位固定,并在颈部正中进行切开。接着,游离出右侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA)。在CCA距离ICA、ECA分叉约2cm处以及ICA起始处使用动脉夹进行临时夹闭,在ECA距离分叉远心端约1cm处结扎。随后,从耳缘静脉注射肝素钠200U/kg,并等待5分钟。使用细针自ECA结扎处近侧刺入动脉进入导丝,在穿刺点近侧束以牛皮筋以备止血。撤除右CCA动脉夹,继续通过导丝进行操作,撤除穿刺针(撤除时为了防止穿刺点出血,拉紧牛皮筋),然后将2.0mm直径的球囊导管经右ECA至右CCA入主动脉弓,充气气囊,压力为810.6kPa。自主动脉弓向右ECA后退,机械扩张右CCA,每次重复3次,每次持续30秒,使右CCA内膜剥落及机械损伤,撤出导管。在穿刺点近侧结扎右ECA之后,将兔置于室温下进行标准混合饲料喂养。15天后重新进行麻醉,仰卧位固定,并在颈部正中进行切口,暴露双侧CCA,然后取自颈动脉分叉近心侧CCA 2cm节段送检,以左侧CCA作对照,分别送光镜和电镜观察。送光镜者用甲醛固定,常规石蜡包埋作组织切片,进行HE染色,使用光镜下观察;而送电镜者则使用戊二醛固定标本,接着使用显微镜和计算机分析系统,分别计算横截面管腔内径、内膜厚度和中膜厚度以及内膜/中膜厚度比值。
(2)模型特点 在光镜下观察,球囊扩张术后第3天可以看到贴壁血栓形成,少量炎性细胞浸润,弹性层回缩,但没有明显的血管平滑肌细胞增殖。而在第7天之后,新鲜血栓较少,并出现未溶解血栓,平滑肌细胞移位生长明显,少量炎性细胞浸润,内膜增厚。15天后,内膜明显增厚,主要成分为血管平滑肌细胞和富含胶原的基质。在电镜下,可以看到血管平滑肌细胞下出现新生血管,其核呈不规则形,部分核膜内陷,胞质中有大量细胞器、线粒体、粗面内质网、质膜小泡等活跃的细胞器,表明其功能极为活跃。此类细胞周围可见大量胶原纤维。
(3)比较医学 目前用于颈动脉球囊扩张再狭窄研究的动物模型有猪、犬、猴、大鼠和兔等,方法基本相同。有研究认为,兔进行球囊扩张术后所产生的病理变化主要为平滑肌细胞的迁移和血细胞的黏附,而大鼠的病理变化主要为平滑肌细胞的增殖。这种模型是模仿人类颈动脉球囊扩张血管成形术后再狭窄的病程。在制作过程中,球囊导管直径对模型效果影响较大,因此在选择动物时应尽可能使体重差异最小。
北检院部分仪器展示