(1)复制方法

为了得到心肌细胞，我们可以使用Harary等人所建立的方法。首先，从生后2-4天的Wistar(或Sprague-Dawley)大鼠的心室中取出细胞，然后使用胰蛋白酶将细胞分离。接下来，使用含有15%新生小牛血清的199(或Eagle)培养基制备细胞悬液。我们将细胞悬液接种到玻璃培养瓶中，每个瓶子的细胞数量为3×1000000个，然后将培养瓶放置在二氧化碳培养箱中，以37℃，95%空气+5%CO2的条件下培养。每2-3天更换一次培养基，并选取培养3-8天的单层细胞进行实验。

如果我们想模拟心肌细胞的缺氧缺糖损伤，我们可以将无糖Hank'S液或不含葡萄糖的Eagle培养基用高纯度氮气饱和30分钟，使培养液中氧分压低于30mmHg(4.0kPa)。当我们将单层心肌细胞放入缺氧缺糖的培养基中后，我们可以快速充入氮气(1L/min流量)30秒，以驱除瓶内的氧气，接着封紧瓶塞，使它保持密闭状态。不同时间的缺氧会导致不同程度的心肌细胞损害。如果我们想模拟心肌细胞的缺氧再给氧损伤，我们可以使用与上述方法相同的技术，但需要在缺氧后的第3小时将其换成正常含糖的Eagle培养基或Hanks液(96%空气+5%CO2)进行培养1小时，以模拟再次供氧的损伤情况。

(2)模型特点

这种方法可以模拟心肌细胞缺氧以及缺氧细胞在培养基中产生的代谢产物增加的情况，相对于缺血模型更具有实验环境和代谢上的差异。

(3)比较医学

心肌细胞培养能消除神经体液、冠状动脉血管等因素的干扰，可以让所有的细胞处于相同的环境中，从而使实验更为可靠。在一定的实验条件下，我们还可以观察药物对心肌细胞的收缩功能以及缺氧损伤的保护作用。

北检院部分仪器展示