(1)复制方法  本实验使用体重在210-290g的雄性Wistar大鼠，将戊巴比妥钠按照每个体重45mg/kg的剂量腹腔注射麻醉。接着，注入2mg肝素后，打开胸腔，取出心脏并置于一个恒温恒压的装置中以70cm H2O(6.86kPa)的压力下进行灌流。灌流液为含有富氧和8mol/L葡萄糖的K-H溶液。我们使用医用缝针3x6和医用缝线00号，在冠状动脉前降支区域作一缝线以制作待扎缝线，并打结拉紧该线以阻断该支动脉。要解除结扎并再次灌注时，在缝线与待扎组织间填入一直径约1.5mm的塑料丝。先拔出该塑料丝，再剪断结扎线以解除结扎。灌流分三个阶段：①预备灌流期：用含8mM葡萄糖的富氧K-H溶液灌流5min，以使心脏达到稳定状态。②冠状动脉结扎期：结扎冠状动脉前降支，结扎时间分别为10、15、30及60min。③恢复灌流期：解除结扎，使原结扎区再次获得含8mM葡萄糖的K-H溶液灌流20min。我们将每分钟经过心脏冠状血管流出的液体量收集并测量，并以ml/min表示灌流液流量。以预灌期的3.5～4.5min时的流量为基础流量。结扎期初流量分别为结扎后3.5～4.5min时的流量；至于结扎期终流量，则是指解除结扎前1.5～0.5min时的流量。复灌期初流量分别为解除结扎后3.5～4.5min时的流量，而复灌期终流量是指在18.5～19.5min时的流量。我们将基础流量设为100％，并将其他时期的流量与它进行比较以获得相对流量。在灌流结束后，我们取出心脏，并在冠状动脉内注入4ml的pH为7.4、浓度为0.1mol/L的磷酸缓冲液配置的6％戊二醛作为灌注固定。接着，我们采取结扎区和非结扎区的样本，并制作成电子显微镜和光镜切片供进行组织学检查。

(2)模型特点  离体大鼠心脏冠状动脉结扎缺氧模型具有以下特点：它能够对离体大鼠心脏进行不同缺氧时间和不同缺氧方式的实验，结果表明在离体灌流大鼠心脏上结扎其冠状动脉也会产生与心肌缺氧相似的特征性改变，因此它不仅能反映出心肌缺氧的很多共同特点，还能够产生缺血性心脏病的病理特征。

(3)比较医学  和在体心脏冠脉结扎模型相比，本实验制备的模型能够复制心肌缺氧的特征性改变。由于本实验条件单纯、易于控制，心脏的活动既没有神经调节，也没有体内其他调节物质的参与，因此本实验具备一定的优势。此外，在同一标本上，有缺氧和非缺氧两个区域，易于进行自身对照。但需要注意的是，结扎区仍会有一定的侧支循环补偿，这是和整体缺氧灌流实验有所不同的。

北检院部分仪器展示