一、实验目的

(1) 熟悉建立吗啡依赖大鼠模型的方法，复制吗啡依赖大鼠模型。

(2) 观察吗啡依赖大鼠的戒断症状并评分，判断吗啡依赖大鼠模型成功建立与否。

(3) 探究建立吗啡依赖大鼠模型的适宜方法和标准。

二、实验材料与方法

(一) 实验材料

1. 所需设备

(1) 带盖玻璃标本缸(高度不小于45cm，直径30cm)：用于观察大鼠的戒断症状。

(2) 普通电子天平称量大鼠体重。

(3) 大鼠饲养笼具及相关设施(含饮水、喂食、垫料)等。

2. 所需试剂

(1) 盐酸吗啡注射液：规格1ml为10mg×10支/盒，批号为国药准字H21022436。常温保存。

(2) 0.9％氯化钠注射液：500ml/瓶，批号为国药准字H20056626。常温保存。

(3) 盐酸纳洛酮注射液：规格0.4mg为1ml×5支/盒，批号为国药准字H20055758。常温保存。

3. 实验动物：健康SD大鼠40只，体重(260±20)g，雌雄各半，由昆明医科大学实验动物学部实验动物中心提供。按随机分组原则，分为空白对照组和吗啡依赖组，吗啡依赖组又分为吗啡依赖1周组、吗啡依赖2周组、吗啡依赖4周组、吗啡依赖8周组4个亚组。

(二) 实验具体方法和操作步骤

1. 实验前准备：拟定实验计划，准备实验材料和设备。

2. 实验操作： 吗啡依赖组大鼠按逐日递增原则，背部皮下注射盐酸吗啡注射液，每天注射3次(8：00、12：00、16：00)，连续注射5d。每次注射剂量依次为：第1天5mg/kg、第2天10mg/kg、第3天20mg/kg、第4天40mg/kg、第5天50mg/kg。每次注射前严格消毒，用一次性注射器注射，每天称动物体重一次。空白对照组注射相同剂量的生理盐水。4组吗啡依赖大鼠于第6天每组随机选取2只于吗啡注射前2h皮下注射盐酸纳洛酮注射液5mg/kg进行催促实验诱发戒断症状，放在玻璃标本缸中观察戒断症状并给予评分，空白对照组给予同样处理并给予评分。 确认吗啡依赖后，吗啡依赖1周组、吗啡依赖2周组、吗啡依赖4周组、吗啡依赖8周组分别给予30mg/kg盐酸吗啡背部皮下注射，每天一次，连续注射1周、2周、4周、8周，建立4个不同时段的吗啡依赖大鼠模型。

3. 实验结束后：记录实验数据，清理实验设备和实验环境。

(三) 实验操作中各步注意事项

(1) 在大鼠注射吗啡实验第一阶段的5d中，可能出现死亡情况。尤其是第3天(将注射剂量从10mg/kg提高到20mg/kg)和第4天(将注射剂量从20mg/kg提高到40mg/kg)。由

北检院部分仪器展示