一、实验目的

本实验旨在建立一种可行的树鼩脊髓全横断损伤(SCT)模型及后肢运动功能缺损评价方法。

二、实验原理

本实验采用T7左侧半横断+T10右侧半横断的方法，完全切断上行及下行神经纤维传导束，达到类似于同一节段脊髓全横断损伤的效果。

三、实验材料与方法

(一) 实验材料

1.设备：全自动消毒锅、电热恒温鼓风干燥箱。

2.试剂：水合氯醛粉，0.9％氯化钠溶液，医用碘伏消毒液。

3.试剂配制：3.6％水合氯醛溶液、称取3.6g的水合氯醛粉溶解于100ml灭菌的0.9％氯化钠溶液中，室温保存。

4.实验动物：雌性树鼩，体重(110±10)g。

(二) 实验具体操作

1. 制备SCT模型

(1) 麻醉：使用3.6％水合氯醛腹腔注射(1ml/100g)进行麻醉。

(2) 备皮：使用电动剃毛刀剃除树鼩胸背部毛发，并用胶带固定四肢于方形木板上。

(3) 消毒铺巾：使用医用碘伏消毒液常规消毒胸背部皮肤，然后铺上无菌孔巾。

(4) 定位：将树鼩背部脊柱明显的凸起作为对照点(神经节段T10对应的棘突)进行定位。此外，也可以从第13根肋骨往上数至第10根肋骨，其对应的棘突即为T10对应的棘突。

(5) 切口和切断：使用3.6％水合氯醛腹腔注射麻醉树鼩(1ml/100g)，然后分层逐层暴露T8～T10(第6～8胸椎)节段脊椎棘突，并咬除T8～T10节段棘突及椎板，使T10脊髓暴露，再进行双侧脊髓半横断损伤：先用尖刀沿脊髓后正中沟垂直刺下抵达椎管前壁，然后沿椎管前壁划向左侧，切除T7左侧半脊髓，同样的方法切断T10右侧半脊髓。

(6) 关闭切口：逐层缝合深筋膜和皮肤，然后关闭切口。

(7) 术后护理：术后使用青霉素20万U/0.2ml预防感染，并进行人工挤尿护理。将树鼩放入分笼饲养，在规定时间喂食和给水，以及进行自然光照和通风。

2. 进行运动功能评价

使用BBB(locomotor rating scale)评分量表(共21级)分别于损伤后不同时间点对T8脊髓左侧半横断后左侧下肢运动功能缺损情况进行评定，评分时将动物置于无障碍物的平台上。观察其后肢的行走及肢体活动5min。

(三) 实验注意事项

(1) 暴露脊髓的范围要充分咬除T7～T10对应的棘突和椎板，以方便切断脊髓操作。在暴露脊髓过程中也需要特别小心和仔细，以免在横断前损伤硬脊膜和脊髓。

(2) 树鼩身体较小，皮肤菲薄，术后抵抗力差，最好在笼底垫一层木屑，起到保暖并预防压疮的作用。

四、获得的实验结果

(1) 使用本方法可成功制备出树鼩T7左侧半横断+T10右侧半横断(脊髓全横断)损伤模型。

(2) 树鼩脊髓全横断损伤后可能会导致下肢痛觉敏感，出现自残咬伤下肢脚掌的情况。

五、结果分析

(1) 本方法建立的SCT模型具有较好的实验可行性。

(2) 自残咬伤下肢脚掌会影响实验结果的准确性，应对这种情况给予充分的关注。

六、经验与体会

(1) 小动物术后保暖及预防压疮十分重要，需特别注意。

(2) 在

北检院部分仪器展示