大鼠后肢深静脉血栓模型
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1.造模材料:本次实验选用的是体重为300g的SD大鼠雄性,用苯巴比妥钠作为药物。
2.造模方法:对实验组的SD大鼠进行腹腔注射麻醉,然后通过切开腹部进入腹腔,结扎下腔静脉下端和双侧髂总静脉,并采用双层关腹的方法进行缝合,而对照组则不进行结扎。手术后,实验组动物不用抗凝药,自由活动和进食。
3.造模原理:本模型静脉血栓形成的主要原因是结扎导致的静脉血流淤积,同时手术引起的血液凝固性提高也可能是参与因素。
4.造模后的一般变化:实验组SD大鼠在模型制备后呈现出双后肢颜色先变苍白,后变青紫,双后肢呈僵硬,双足温度低的现象。6小时后,青紫明显并开始肿胀,而双后肢活动仍然较少。12小时后,双足变为深紫色,足温上升,活动仍不多。到了2天后,双足肿胀最严重,但青紫颜色渐退,双后肢活动增加,但尚不能站立。到了4天后,双后肢肿胀开始减退,而双后肢却可站立活动,但行走活动仍不多。到了8天时,双后肢已经可以站立活动,但仍然存在肿胀的情况。而对照组的SD大鼠则在所有时间段内与双前肢无明显差别,6小时后即可站立行走,双足也无肿胀,皮温、颜色等方面与术前无明显差别。
5.造模后病理变化:通过光镜检查发现,实验组SD大鼠在6小时时,股静脉见不完全性血栓形成,发生率为42%,静脉内膜未见损伤;而到了12小时时,股静脉为不完全性血栓多,发生率为50%,但部分已经为完全性血栓,发生率为17%,静脉内膜损伤不明显。到了2天时,股静脉仍为不完全性血栓多,发生率为67%,完全性血栓发生率为25%,接近静脉内皮损伤,部分血管内皮细胞脱落,内皮下层裸露。到了4天时,静脉血栓发生率为92%,多为完全性血栓,见静脉内皮损伤,血栓收缩,与静脉壁粘连。到了8天时,静脉血栓发生率为83%,完全性血栓为58%,部分新生血管内皮细胞可形成迷路,相互沟通,使股静脉再通。不过,在全部时间组内都未发现大鼠后肢出现溃疡形成或足趾坏死脱落的情况。而对照组则在6小时、12小时、2天、4天、8天时,多数未见静脉血栓形成,仅观察到少数股静脉不完全性血栓形成,静脉血栓发生率为0%、8%、17%、0%、8%,静脉内皮未见明显改变。
通过电镜观察,我们得知6小时和12小时时实验组股静脉超微结构与对照组相似;而到了2天时,实验组中股静脉内皮细胞坏死,部分脱落,内皮下层裸露;到了4天时,我们发现白细胞对股静脉壁的黏附;到了8天时,我们还可以看到白细胞对股静脉壁的浸润。
6.注意事项:实验中的手术器械必须进行严格消毒,以防手术感染的发生,手术创伤应尽量小,同时严格进行无菌操作。
荣誉资质
北检院部分仪器展示