1. 病毒及攻毒

Zaire亚型病毒是一种致命的病毒，攻毒时需要使用适宜的剂量，本实验中使用的攻毒剂量为10的3.8次方pfu/0.5ml PBS，通过右上肢内侧皮下注射进行。

2. 实验动物

本实验使用SPF级strain-13成年豚鼠作为实验动物，对实验动物进行长期观察，记录动物的一般状况，包括眼、鼻、口、脸、耳、爪、四肢、肛门、尾、被毛、活动和精神状况。

3. 实验环境

为保证实验结果准确性，本实验在BSL-4级实验室中进行操作。

4. 实验步骤

攻毒后每天称重1次，攻毒后1～5、7、9天每天安乐相同数量的豚鼠 (3只左右)。同时取血及组织进行病毒分离和RNA检测。为保证实验结果可靠，同时设立未攻毒豚鼠对照。

5. 病毒分离

对实验动物进行解剖时，取出如上组织后，进行研磨处理，接种至Veto细胞中，每天观察细胞病变情况，以进行病毒分离。

6. 病毒RNA的检测

将取出的组织放入1ml裂解液(Qiagen)中，用研磨器充分研磨，离心后取上清放入buffer RLT(已加入1％巯基乙醇)350μl，4℃，13000转/分离心3min，将上清转移至新1.5ml微量离心管中。提取样品病毒核酸，再将RNA反转录成cDNA，通过荧光定量PCR仪直接测定病毒核酸载量，以进行病毒RNA检测。

7. 病毒抗体检测

动物在不同时间点处死采血，分离血清，并通过特异性ELISA试剂盒对抗体进行检测，以进行病毒抗体检测。

8. 病理观察

对于解剖时取出的组织，需要进行病理切片后进行常规染色，观察各组织的形态变化，如病变的形成和分布情况，以进行病理观察。

9. 建模结果

经实验结果表明，攻毒后约5天动物开始出现不进食、发热、脱水等临床症状，8～11天后无一例外的死亡，但并不伴随出血的现象。病毒在攻毒后2天可检测到肝和脾中，3天后病毒扩散至肾、肾上腺、肺及胰腺等组织。病毒平均病毒效价随后逐步上升，并于9天时达到峰值。病毒血症于7天时达到近100000pfu/ml的峰值。感染的豚鼠同时还逐渐出现凝血时间延长等现象。

北检院部分仪器展示