(1)用豚鼠脊髓匀浆免疫Wistar大鼠诱导EAE模型

为了研究多发性硬化（MS）的发病机制和寻找新的治疗方法，我们使用豚鼠脊髓匀浆免疫Wistar大鼠诱导实验性自身免疫脑脊髓炎（EAE）模型。在实验中，我们选择了体重为130～200g的6～8周龄的雌性Wistar大鼠作为实验动物，豚鼠脊髓作为免疫抗原。

我们制作了豚鼠脊髓匀浆-完全弗氏佐剂的配制作为免疫抗原。具体步骤是，使用氯胺酮过量麻醉豚鼠，取出豚鼠脊髓并去除脊膜，用预冷的生理盐水制成豚鼠脊髓生理盐水匀浆，再与等量的完全弗氏佐剂混匀后制成油包水型乳剂。

实验组大鼠于4足垫皮内各注射免疫抗原0.1ml，1只共计0.4ml，同时足跖背面皮内注射百日咳疫苗0.1ml。实验对照组大鼠于4足垫皮内各注射等量CFA加生理盐水。

(2)用豚鼠脊髓匀浆为抗原致敏DA大鼠诱导EAE动物模型：

为了更深入地了解MS病理和寻找新的治疗方法，我们选择了体重为250～300g的雌性Dark Agouti(DA)大鼠建立EAE动物模型。并且我们将豚鼠脊髓匀浆与完全弗氏佐剂混合作为抗原佐剂乳化物。

在制作抗原佐剂乳化物的过程中，我们使用预冷的冰生理盐水将豚鼠脊髓加至体积比为1/1.5，再加入等量的完全弗氏佐剂，用注射器反复抽打制成油包水状态的乳剂。

DA大鼠EAE动物模型的建立是通过单点皮下注射抗原佐剂乳化物0.2ml实现的。在免疫后的几天内，我们每日观察大鼠的饮食、活动情况，并称量体重。

(3)用同源猴脑白质匀浆制作食蟹猴EAE模型：

为了更加深入地研究MS的病理机制，我们制作了猴脑白质匀浆作为食蟹猴EAE模型的抗原。我们选择了体重为2.5～3.0kg的雌性食蟹猴作为实验动物。

在制作抗原佐剂乳化物的过程中，我们以健康的食蟹猴脑为原料，去除灰质后加入PBS制成猴脑白质匀浆，再加入等量的CFA，用注射器反复抽打制成油包水状态的乳剂。

通过腋窝和腹股沟皮下注射免疫动物，每处注射0.2ml，每次3～4处，我们成功建立了食蟹猴EAE动物模型。

为了对EAE的临床病情进行评估，我们将猴EAE的临床病情分为6级，其中0级代表正常，5级代表濒死状态。在进行病理检查时，我们使用HE染色和Luxol fast blue染色法观察炎症变化和髓鞘变化，并使用电镜对组织切片进行观察。

北检院部分仪器展示