脂多糖(LPs)诱导的大鼠葡萄膜炎
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1.原创方法使用Wistar大鼠体重350~450g,无论是雌性还是雄性都可以。需要使用LPS将其溶解在灭菌的PBS中,配成1mg/ml的浓度溶液。然后使用25mg/kg的氯胺酮和5mg/kg的盐酸赛拉嗪混合物,进行腹膜内注射来麻醉大鼠。等到麻醉达到满意程度之后,注入5μg的LPS到大鼠的玻璃体腔内,以诱导葡萄膜炎。随后,每隔12小时需再进行一次肌肉内注射2mg/kg的盐酸曲马朵,作为止痛处理。在造模完成24小时后,需要将大鼠的眼球摘除并使用10%甲醛溶液进行固定处理。接着进行免疫组化检查和Western-blot分析。
2.观察指标及分析
(1)组织学分析:对于LPS处理组,可以在光学镜下观察到大量多形核细胞PMN的聚集。
(2)Western-blot分析:在角膜中,可以发现一氧化氮合酶(NOS-2)蛋白表达量增加。此外,硝基酪氨酸(NO2Tyr)在角膜上皮中呈阳性表现,而在对照组中则几乎没有或呈阴性表现。
北检院部分仪器展示