霍乱弧菌内毒素诱导大鼠葡萄膜炎模型
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1.模型制作方法 Wistar大鼠,体重200g左右。
(1) 内毒素的制备:首先,通过鉴定获取纯化霍乱弧菌种,并将其传到厚氏肉汤培养基中。然后,将培养物扩大培养,并在加入甲醛灭活后收获细菌。接着,分离、纯化LPS。取灭活菌体,加入无热原双蒸水(PFW)搅拌成菌悬液。混合液在冰浴中处理后,在PFW中透析,真空冷冻干燥后,保存(T-20℃)。最后对LPS进行配制。
(2) 动物致敏:将健康成年Wistar大鼠用液体石蜡进行皮下注射致敏。
(3) 注射LPS:将已致敏的大鼠足垫部注射第一种配方,腹腔注射第二种配方。
2.观察指标与分析
(1) 眼部症状:注射LPS后,大鼠的虹膜血管扩张充血严重,前房角粘连,脉络膜血管增生,并有弥漫性血细胞浸润。此外,还可见白细胞增多和局部水肿皱褶。视网膜与脉络膜脱离,局部水肿增生。系列临床可见的炎症反应,症状与葡萄膜炎一致,且随时间逐渐减轻。
(2) 病理检查:角膜上皮水肿,角膜基质排列较松散。睫状体血管增多充血并可见蛋白样渗出。虹膜血管扩张充血严重,前房角粘连。脉络膜血管增生,并有弥漫性血细胞浸润,其间可见白细胞增多。视网膜局部蛋白样渗出并累及与其紧连的节细胞层,纤维层被渗出物所掩盖或趋于缺失。局部纤维层的纤维丛集成束团状,遍布其间,有的发生严重纤维化,同时可见其间的血管内有血栓样物形成。切片还显示视网膜中血管的扩张充血,特别是内核层和外网层中毛细血管的扩张,以及视盘部视网膜主动脉管壁周围有大量纤维包绕,紧连的视网膜部分出现增生或肿大,纤维层纤维化。
北检院部分仪器展示