控食加强迫跑步加普萘洛尔心气虚证动物模型
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(1)方法为了复制力竭运动引起心肌损伤的动物模型,在成年小鼠上进行实验。实验全程按照基础进食量控食饲养,每天喂饲鼠用精饲料量为75g/kg体重,并且进行强制跑步,速度为25m/min。当动物受到电击达到10秒还不能跑步时,被定义为达到疲劳标准,实验连续进行20天,其中17天开始灌服普萘洛尔0.5mg/只,连续4天。实验过程中每日观察动物一般状况和体征。在21天后,动物麻醉,检测心血管相关的各项指标。同时还取血测定血浆心钠素、cGMP、cAMP,血清丙二醛、超氧化物歧化酶等指标。然后取脾制备细胞悬液,脾细胞加入脂多糖及PHA,在37℃、5%CO2环境中刺激培养72小时,收集培养上清液检测白细胞介素-2、白细胞介素-4、白细胞介素-10以及肿瘤坏死因子。
(2)模型特点使用这种方法所制造的心肌损伤动物模型会在3到4天内出现呈觅食状、少动、皮毛蓬松且少光泽、体重增长减缓的特征。随着时间的推移,7至8天后,动物精神萎靡,鼻尾颜色呈现浅色,有缩肩拱背的现象,体毛竖立,行动迟缓。在连续灌服普萘洛尔后,动物的萎靡加重,特别是在强迫运动后。在21天后,除了 cAMP、cGMP无明显变化,其他指标均有显著改变。例如,舒张间期平均值、平均左室内压下降最大速率(-dp/dt max),MDA、IL-4和IL-10明显升高,而最大心室内压、平均心室内压、心室峰压平均值、发展压平均值、心率、收缩间期/舒张间期、平均左室内压上升最大速率(+dp/dt max)、平均Vpm、平均心室峰压乘以心率、ANP、SOD、TNF-a明显降低。同时IL-2也有降低的趋势。
(3)比较医学相对于负重游泳法,本模型所采用的方法特点在于将力竭运动所采用负重游泳法改成了强迫跑步,并建立了以受电击10s后仍不能奔跑为力竭标准。与负重游泳法相比,本方法存在环境影响因素小、力竭标准明确、方法简便等优点,实验过程也更容易有效控制。采用该模型制作时,部分动物可能会出现运动耐受情况,因此需要根据相应的四诊与实验指标来评估模型的成功与否。
北检院部分仪器展示