传统基因敲除技术面临着许多限制和挑战，尤其是对于那些与发育相关的基因，一旦全部去掉这些基因，就会引起胚胎致死，难以进行下去的研究。而许多基因的表达具有时空性和细胞类别特异性，传统技术也无法控制基因敲除的细胞类型和时空性。

为了解决这些问题，Rajewsky实验室最先利用了Cre- LoxP点特异性重组系统，成功地建立起了条件基因敲除技术。该技术不仅能够控制基因敲除的细胞类型和时空性，还能够达到时间控制的特定组织、器官控制特定基因表达的效果。目前，主要使用的两种系统是Cre/LoxP和Flp/Frt。

通过在小鼠中利用LoxP位点制作条件性敲除，研究人员可以与全身性表达Cre重组酶的转基因或基因敲入Cre小鼠交配，进而获得全身性敲除小鼠。此外，还可以通过利用组织特异性启动子控制Cre重组酶的表达，实现特定组织、器官控制基因表达的效果。例如，利用他莫昔芬诱导的Cre小鼠与利用LoxP位点制作的条件性敲除小鼠交配，如Myh6-MerCreMer小鼠，就可以达到时间控制的特定组织、器官控制特定基因表达的效果。

随着条件基因敲除技术的不断发展和应用，相信在今后的研究工作中，这一技术将发挥更加重要和广泛的作用，为探索基因的功能和细胞的发育提供更为有力的工具。

图3-10：利用LoxP位点制作条件性敲除小鼠

北检院部分仪器展示