土拨鼠（Marmota monax）是松鼠科的一种哺乳动物。于1978年，Sumners等人发现土拨鼠携带着与人类HBV相似的肝炎病毒，随后称为Woodchuck Hepatitis Virus（WHV）。WHV和HBV在形态学、基因结构、复制过程及致病性等方面极为相似，而自然状态下土拨鼠的WHV慢性持续率可达30％，肝癌发生率也高于人类的HBV感染，此外实验证实了HDV复制。因此，土拨鼠是研究HBV和HDV感染的经济而有用的动物模型，同时也是猴痘病毒的主要传播途径。

自从1978年发现WHV以来，土拨鼠已成为研究HBV感染发病机理以及肝细胞癌发生过程的重要动物模型。近年来，土拨鼠被广泛用于疫苗的研究和抗病毒药物的筛选。从美国康奈尔大学动物中心可以购买到土拨鼠及各种动物模型，中国医学科学院实验动物研究所也保有该动物品系。

1. 土拨鼠肝炎病毒感染模型

土拨鼠感染WHV容易转化为慢性感染，并通常表现为慢性活动性肝炎。在感染后2年，约有50％的土拨鼠进展为肝细胞癌，而感染后4年几乎100％进展为肝细胞癌。该模型已被广泛应用于肝细胞癌发生分子机制的研究。此外，土拨鼠模型也是研究病毒基因在其生命周期中具有何种生物学功能的很有用的体内模型。对土拨鼠WHV感染模型的研究发现，病毒感染肝细胞的自发清除可能是肝脏细胞再生与原位表达的抗病毒因子发挥旁观者效应联合作用的结果。

2. 肝移植乙型肝炎再感染模型

肝炎病毒阴性土拨鼠作为供体，而慢性携带病毒的土拨鼠作为肝移植受体，Dahmen等人首次建立了肝移植乙型肝炎再感染模型。土拨鼠是研究肝移植HBV再感染最合适的动物模型，而且能够很好地耐受手术。病毒在移植物中的首要标志是WHsAg，可通过检测肝窦内的WHsAg来证实再感染，同时大多数肝细胞内WHsAg和WHcAg染色呈阳性，移植肝中的病毒DNA及RNA也被检测出。

3. HDV感染土拨鼠模型

将HDV接种到携带WHsAg的土拨鼠体内，可以在接种后1-5周的血清中检测到HDAg，第2-8周达到高峰。使用免疫组化法，在土拨鼠肝细胞核和细胞浆内也可以证明有存在HDAg，肝组织在接种后3-8周出现典型的肝炎病变。

4. 土拨鼠转基因肝炎模型

(1) Casey等人在2006年从HDV感染者体内分离出HDVⅠ型基因，并将比HDV cDNA长1.2倍（包含HDV cDNA）的一段基因组DNA克隆进pGEM3Zf（＋）质粒的Ps＋Ⅰ-SphⅠ焦点，构建了pGDLx1.2重组基因表达载体。DNA测序分析发现，插入片段包含HDV-1基因组和抗基因组的核酶。

(2) HDV cDNA转染土拨鼠

使用土拨鼠慢性肝炎病毒携带者，注射50μg HDV构建的质粒pGDLx1.2，注射剂量为0.5ml，注射部位为手术暴露的肝脏多点注射。每周抽取血样做RT半定量PCR检测HDV RNA。从感染后第7-15周获得高滴度的土拨鼠肝炎病毒Ⅰ型（WHDV-1）病毒阳性血清，通过位点杂交法检测到血清中HDV RNA浓度为1×10的9次方当量/ml。

北检院部分仪器展示