1. 建模方法

本实验选用体重为113.2±1.8g的4～6周龄清洁级雄性SD大鼠作为实验动物，并使用重组腺伴随病毒作为载体介导丙型肝炎病毒核心区cDNA(HCV-Core)的重组，制备含HCV-Core的rAAV毒株，其效价为2.41×10的11次方/ml。在手术过程中，20只大鼠麻醉后切除40％肝，在剩余肝叶内直接注射含HCV-Core基因rAAV 20μl，同时，照样操作，另20只注入空载体rAAV作为对照。所有动物术后进行常规饲养。

2. 建模结果

术后1个月及4个月，共安乐处死了10只大鼠，取其肝组织进行Southern blotting和Dot blotting杂交，以测定鼠肝内HCV-Core区基因整合、mRNA表达情况。结果表明，HCV-Core区基因的非定点整合让肝细胞mRNA的Dot blot杂交结果均为阳性，HCV-Core mRNA被成功地表达出来。

总而言之，动物模型作为一种工具，旨在用于研究人类疾病、评价治疗策略和药物安全性。然而，除了人类和黑猩猩之外的动物对HCV的感受性较低，这限制了动物模型的建立。尽管表达HCV蛋白的转基因小鼠模型具有一定的应用价值，但它不是真正意义上的动物模型，不能用于HCV的生命周期、病毒进入和复制以及抗病毒药物和疫苗的开发等方面的研究。

为解决HCV可感染的宿主范围业狭窄的问题，我们需要建立表达多种人类HCV受体蛋白的转基因小鼠。CD81是HCV感染的受体之一，然而，肝中表达人CD81蛋白的转基因小鼠对HCV并不敏感，这表明人的CD81蛋白并非是HCV感染小鼠时的唯一决定因素。因此，构建能允许HCV感染的转基因小鼠就需要同时表达数种人的HCV受体蛋白，诸如SCARB1，CLDN1和OCLN等。建立能感染HCV的转基因小鼠模型有助于我们更好地了解HCV感染中的免疫和病理机制。

北检院部分仪器展示