1．实验动物 本实验使用了4周龄、体重约为12g的雄性BALB/c小鼠作为实验动物。此外，还使用了Coxsackievirus B3 (CVB3)病毒、Hep-2细胞株和VERO细胞株。

2．实验方法 首先进行毒力的测定。将CVB3病毒用维持液进行连续10倍稀释，从10的-7次方到10的-12次方，使用96孔板，每个稀释度病毒液种3个细胞孔。然后，在每个孔中加入0.05ml病毒液、0.05ml维持液和0.05ml VERO细胞液，于37℃、5％CO2、100％湿度的条件下培养。每天观察细胞病变，待无新的细胞病变出现时，记录结果。按照Reed公式计算TCID50 (半数感染剂量)。计算方法：TCID50效价=高于50％细胞病变百分比之病毒稀释度的倒数+距离比例。距离比例=(高于50％的死亡百分数－50)/(高于50％的死亡百分数－低于50％的死亡百分数)=(67－50)/(67－10)=0.3。查对数表算出TCID50=10的10.3次方，该病毒的TCID50为10的12次方TCID50/ml。结果显示，CVB3在VERO细胞液测得的病毒液滴度为10的12次方TCID50/ml，能够在BALB/c小鼠注入一定量CVB3病毒液产生中等程度病毒性心肌炎。接着，取60只体重约为12g的BALB/c小鼠，将含有1000000 TCID50 CVB3病毒0.1ml的液体注射到其身体内。在实验第7天和14天时，分别死亡10只小鼠，进行无菌取心脏、修剪血管及结缔组织、称重，并且用10％中性甲醛固定，待做光镜检查。

3．参考结果 经过观察发现，感染了CVB3病毒的小鼠在第三天出现病毒性心肌炎的疾病症状，表现为体重增长减缓、毛发呈现蓬松状、出现颤抖、体温降低，有些小鼠后肢无力、瘫痪。解剖时，感染了CVB3病毒的小鼠的心脏表面上可以明显地看到白色斑点或斑块。接种CVB3病毒后的第1天，在心肌组织中可以检测到病毒的存在，第3天病毒含量达到高峰，然后心肌组织中病毒滴度逐渐下降，直到第9天，病毒在心肌组织中仍保持较高的滴度。感染后，心肌出现不同程度的变性坏死、心肌间隙增宽，血管扩张充血，炎性细胞呈灶性或散在分布(以淋巴细胞和单核细胞为主)，并在心外膜处尤为明显，同时还可见到组织细胞增生的现象。

北检院部分仪器展示