角膜移植是一种重要的治疗方法，但是移植排斥反应是角膜移植失败的主要原因，临床一般发生在术后1～3个月。为了研究其发生机制及药物疗效，很多研究者制作了角膜移植动物模型。实验动物的选择对于建立角膜移植模型而言至关重要。

一、选择适合的实验动物

早期由于技术所限多采用兔、羊等较大的动物，但是其供体和受体组织相容性的差异却难以控制。随着研究的深入，发现鼠类角膜MHC抗原的表达与人类角膜相似，同时随着显微手术技术的发展，目前更倾向于采用鼠类进行角膜移植免疫排斥反应机制的研究。小鼠角膜移植由于手术操作困难，因而发展较晚，直至20世纪90年代才有报道。

二、模型制作方法

实验动物的选择后，建立角膜移植模型的方法也需要得当。目前常见的方法有以下两种：

1. SD大鼠(受体)和Wistar大鼠(供体)同种异体穿透性角膜移植模型。首先在供体角膜钻取直径为3.5mm的植片，置于培养皿中并用玻璃酸钠注射液保护植片；受体眼在局部点复方托品酰胺眼液充分散瞳，之后用直径为3.25mm的环钻钻取受体大鼠中央区角膜，弯维纳斯剪协助制备植床，将植片置于植床，用10-0缝线间断缝合8针，前房内注入无菌空气恢复前房。术后需注意预防可能的并发症。

2. Balb／c(H-2d)(受体)及C57BL／10(H-2 d)(供体)小鼠穿透性角膜移植动物模型。首先在受体角膜用1.5mm直径环钻定位，穿刺并注入黏弹剂保持前房深度，用显微剪去除受体角膜；将2mm直径的供体角膜用11-0尼龙线连续缝合在受体植床上8～10针，前房内注入无菌空气恢复前房。术后需注意预防可能的并发症。

三、注意事项

减少角膜移植的并发症，增加排斥反应的发生率，是建立角膜移植模型时需要注意的问题：

1. 术前以1％阿托品眼液或复方托品酰胺眼液充分散瞳；术中缝合植片时避免损伤晶体，尽可能避免对虹膜的机械牵拉，在虹膜发生粘连前尽快结束手术；术后以平衡盐液或无菌空气形成前房，以减少角膜移植的并发症。

2. 钻取植片时接近角膜缘取材，可以获得较多的Langerhans细胞，从而增加排斥率。同时，术后延迟去除缝线也可以诱发排斥反应。

四、结果观察及评分

在建立角膜移植模型后，需要对结果进行观察和评分。评估指标常见的有透明度、新生血管、水肿等。

综上所述，建立角膜移植模型是研究角膜移植排斥反应机制及药物疗效的基础，选择合适的实验动物和模型制作方法后，加强术前、术中和术后处理，并注意并发症和排斥反应的诱发，最终进行结果观察及评分，可以为研究提供支持。

北检院部分仪器展示