棘阿米巴角膜炎是一种造成角膜炎症的严重疾病，病因是由棘阿米巴原虫感染引起。发现80％以上的患者是由使用被污染的角膜接触镜引起的。因此，科学家需要找到一种高效且实用的模型进行实验研究。

邓新国等科学家为此选用了健康的新西兰大白兔，并在实验前3d使用地塞米松和激素点眼治疗，然后注入棘阿米巴原虫的滋养体和包囊悬液到家兔角膜基质内，成功建立了该动物的有效模型。

该模型具有建立迅速、技术简便、易于操作等优点，成为进行棘阿米巴角膜炎实验研究的有力工具。此实验模型方法如下：

1. 实验动物：选用健康的新西兰大白兔。

2. 原虫培养：使用手术切除的角膜材料分离出的棘阿米巴原虫，培养基使用蛋白胨-酵母-葡萄糖(PYG)组成，含有青霉素和链霉素。经过3-5d的培养，把棘阿米巴原虫洗3次，根据生理盐水调整浓度至3×105个/ml，滋养体占80％-90％，包囊占10％-20％。同时使用台盼蓝染色确定原虫的活力，活力>90％。

3. 模型制作方法：在实验前3d，给动物结膜下注射地塞米松2mg，每天1次，并用妥布霉素地塞米松(典必舒)眼液按疗程眼点滴，3-4次/每天。实验开始后停用激素，麻醉动物后使用28号或30号针头的0.5ml胰岛素注射器在模型眼角膜基质内注入棘阿米巴原虫悬液0.2ml。

4．观察结果：模型眼观察到以下现象

(1)临床观察：感染模型眼全部出现了角膜基质炎，12h结膜囊内有分泌物，局部出现炎症反应；24小时外眼分泌物增加，局部形成炎性斑块，球、睑结膜充血；3-14d症状逐渐加重，炎性斑块逐渐增大，整个角膜呈点状混浊，外眼分泌物增多，球结膜及睑结膜充血更为严重。15-30天逐渐停止发展，外眼分泌物逐渐减少，球结膜及睑结膜充血稍有减轻，新生血管开始向炎症斑块内生长。

(2)角膜刮片光镜检查：感染模型眼可见到棘阿米巴原虫的双层壁包裹。

(3)棘阿米巴原虫培养检查：将模型眼的角膜放入2%无营养琼脂糖培养基中央表面，在接种物上滴入1-2滴活大肠埃希菌肉汤，胶布密封后至35℃温箱内进行棘阿米巴原虫培养，可培养出棘阿米巴原虫。

(4)角膜病理学检查：制作Giemsa液染色的角膜病理切片，模型眼可见大量炎症细胞浸润(主要是中性粒细胞)，使用PAs染色可见模型眼病变部位大量棘阿米巴原虫的包囊和滋养体。

北检院部分仪器展示