【操作步骤】首先选取体重在200-250g之间的大鼠，并在饲喂固态饲料的情况下进行实验。从隐球菌感染患者的脊髓液或尿液中收集菌株进行传代培养，通过培养代数的增加，可使隐球菌的荚膜更加厚实并增强其毒性。将隐球菌在甘露醇琼脂培养液中，以37℃培养至对数生长期，之后将其稀释50倍并从大鼠尾静脉处注射0.5ml生理盐水，紧接着注射道诺霉素0.4mg/kg的剂量。这种方法能促使隐球菌在动物体内存活并快速增殖。另一种方法是通过预先将0.4mg/kg的道诺霉素剂量直接注入动物的腹腔，然后等待7-15天进行下一步的注射实验。在用50mg/kg的戊巴比妥钠麻醉大鼠后，打开腹腔并通过肝总动脉注入50倍稀释的隐球菌0.1-0.3ml。为防止菌液流入肝脏，需要通过手指压迫肝动脉；当注射完成后再缝合腹部，并认真进行护理以提高动物存活率。

【结果分析】采用道诺霉素对大鼠进行前期处理后，通过从尾静脉处注射隐球菌，并等待7天的时间，研究员观察到动物开始出现食欲下降、瘦弱、体毛加粗加硬，并失去活力的现象。15天后，研究员使用葡萄糖(0.5g/kg的剂量)进行耐糖实验，结果显示实验组动物的耐糖能力比正常动物低，而对胰岛素的反应也减弱。通过进行病理取材和耐糖试验的结果，研究员发现隐球菌主要附着于胰岛的网状组织，以及胰岛内或者周围组织，并出现了纤维性增殖现象、内分泌细胞变性、坏死、肉芽肿等现象。此外，在肺、肝、肾等脏器内，研究员几乎未能观察到隐球菌的存在。因此，通过肝总动脉注射隐球菌可以使胰岛出现损害，而且需要以缓慢的速度注射，以降低压力和风险。

【注意事项】

1. 在注射隐球菌后，需要将饲育箱底部覆盖塑料布，并将动物的排泄物(主要是尿液)连同塑料布一并烧掉，并且工具必须进行彻底的杀菌消毒。

2. 隐球菌的培养最好使用甘露醇琼脂培养液，并且培养温度为37℃。培养出来的细菌大小可能各不相同，一般在5-30μm之间，其中5-10μm大小的为主。可以通过此菌产生的尿素酶来鉴定。

北检院部分仪器展示