大鼠杏仁核点燃模型
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1.造模材料
动物:本实验选择雌性Wistar大鼠,体重范围在(180±10)g以内。
药物:本实验使用的医药物质为戊巴比妥和青霉素。
器械:体定位仪、电子刺激器、直径为0.25mm的绝缘双极电极、微型插头和牙托粉。
2.造模方法
首先,将大鼠注射戊巴比妥(40mg/kg)进行麻醉,并将其固定在江湾Ⅰ型脑立体定位仪上。根据Ktinig图谱确定大鼠左右杏仁核的坐标,前囟后30mm,旁开48mm,硬脑膜下88mm。随后,插入两根直径为0.25mm的绝缘双极电极,尖端分开约0.25mm,并焊接一微型插头;最后,通过使用牙托粉进行固定。术后连续3天,对大鼠进行腹腔注射青霉素,以预防感染。
术后两周,每天进行一次恒流刺激右侧杏仁核,参数为400μA单相方波,波宽1ms,频率60Hz,持续时间1s。为了记录更详细的信息,还需记录脑电变化及放电潜伏期(latency)、后放电时程(after dis-charge duration, ADD)和发作强度(seizure severity)。其中,放电潜伏期是指刺激结束到刺激核团出现高幅棘波放电的时间;后放电时程是指刺激后杏仁核EEG波幅至少为刺激前的两倍和频率在1Hz以上的放电持续的时间;发作强度根据Racine法进行行为分期:Ⅰ.不动、闭眼、胡须动、嗅;Ⅱ.点头、咀嚼伴有面部抽搐;Ⅲ.一侧前肢抬起,阵挛;Ⅳ.站立并伴有两侧前肢的阵挛;Ⅴ.站立、跌倒,伴有全身性阵挛发作。连续5次出现第Ⅴ期反应即为完全点燃。
3.造模原理
造模方法是通过电刺激杏仁核引起动物癫痫。
4.造模后的变化
造模后,左右杏仁核均出现高幅高频的痫性放电。随着刺激次数的增加,后放电时程进行性延长。在开始刺激时,后放电时程为(10±2.1)s,首次出现第Ⅴ期反应时为(45.3±5.4)s。完全点燃需要刺激次数为(13.3±4.2)次。
5.注意事项
术后需要对手术器械进行严格消毒,以防手术感染。手术创伤应尽可能小,进行严格无菌操作。术后大鼠需要保持分开,等苏醒后3~5小时才能合笼饲养,以防止先醒的大鼠舔咬昏迷大鼠的伤口。饲养室内应尽可能保持大鼠最适温度和湿度。
荣誉资质
北检院部分仪器展示