白色念珠菌感染阴道炎模型
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念珠菌性阴道炎(Candida albicans vaginitis)是一种常见的妇科疾病,85%~95%的外阴性阴道炎由白色念珠菌(Candida albicans)引起。这种真菌在人体内原本是正常菌群之一,但当人体免疫力下降、使用抗生素、口服避孕药、怀孕或患糖尿病等情况下容易引起念珠菌感染。75%的育龄妇女至少患过一次由此菌感染引起的阴道炎,而5%~10%的妇女为复发性外阴阴道念珠菌病。
国外构建念珠菌菌性阴道炎的动物模型已有较长时间。其中,使用小鼠制作模型通常采取直接给小鼠皮下注射外源性雌激素来压制小鼠免疫力并造成假发情状态,而使用大鼠制作模型则首先需将大鼠卵巢摘除,再给予外源性雌激素。在假发情状态下,动物阴道黏膜糖原分泌量增加、阴道内pH值下降,这样有利于念珠菌的繁殖并达到造模目的。
以下是制备小鼠念珠菌性阴道炎模型的详细步骤:
(1)制备菌悬液:将已分离纯化的白色念珠菌菌株接种在含1%蛋白胨和0.1%葡萄糖的液体培养基,25℃水浴振荡培养16~18小时,制成细菌密度为2.5×1000000CFU/ml的菌悬液。
(2)操作步骤:选用8~10周龄的ICR雌性小鼠,在接种前6天开始给每只小鼠皮下注射 0.05ml含有0.1mg苯甲酸雌二醇的油剂,之后每2天注射1次。然后将20μl白色念珠菌菌悬液(即约5×10000个菌孢子)在接种日注入小鼠阴道内。接种后第2天开始,小鼠阴道内即可检测到高水平的白色念珠菌。至接种后第4天,可见阴道腔内出现芽生孢子或菌丝团,第7天,小鼠的外阴红肿,阴道腔内有豆渣样分泌物,表现出类似于外阴阴道念珠菌病妇女的症状。
(3)模型特点:本模型通过注射苯甲酸雌二醇油剂来造成小鼠假发情状态,从而在阴道黏膜浅层出现念珠菌的生长繁殖,忠实还原了念珠菌性阴道炎的发病过程。此模型操作简便,重复性高,可达到100%的感染率,成为对念珠菌阴道炎研究的有力工具。
念珠菌性阴道炎常见临床表现为阴道壁充血、水肿,阴道分泌物浓稠、乳酪样、豆腐渣样等病变,而使用本模型所制得的小鼠阴道炎模型在病理及表现上与人类病变具有高度相似性,具有较好的比较医学价值。
北检院部分仪器展示