腹股沟皮下注射醋酸可的松建立SD大鼠卡氏肺孢子菌感染模型
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(1)造模方法:为了研究肺孢子菌病原的感染机制,实验组在大鼠的腹股沟皮下注射醋酸可的松每只25mg,并通过饮水中添加四环素1g/L的方法预防细菌性感染。在6~12周注射后,实验组陆续进行大鼠剖杀,并将大鼠气管部分横断并插入连接5ml注射器的塑料导管,注入生理盐水进行支气管肺泡灌洗,并收集30~40ml支气管肺泡灌洗液。收集的液体通过2000转/分离心10min的离心过程,取出沉淀,并将沉淀涂片。同时使用生理盐水洗净肺表面血液,并制成肺组织印片和BALs沉淀,将其保存在-20℃的环境下进行后续的研究。
病原检测方法:在进行肺孢子菌感染检测时,实验组提取肺组织印片和肺内灌洗液涂片,并用甲醇固定2min,分别使用三种染色方法进行病原的鉴定。通过使用姬姆萨染色、瑞-姬姆萨染色和亚甲胺兰染色,实验组成功鉴定出肺孢子菌的感染情况。
(2)结果:在实验过程中,大鼠用药第2周后出现体重不升的现象,并开始下降。至第6周,大鼠体重减少了约32%。同时,动物活动和摄食量都明显减少,出现了萎靡、消瘦、斑片状毛、呼吸急促等不良反应,导致大部分实验对象因呼吸极度困难而死亡。
在肺孢子菌病原学的染色检查中,实验大鼠的肺印片肺孢子菌阳性率为96%(24/25),而BALs沉淀涂片阳性率则为44%。实验结果显示,诱导实验包囊检出时间最早为用药40天,同时随着用药时间的延长,感染程度逐渐加重。值得一提的是,对照组全部未检出阳性。
北检院部分仪器展示