人巨细胞病毒诱发小鼠宫颈癌模型
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(1)复制方法 将HCMV AD 169株病毒悬液与人胚肺细胞常规接种,其滴度为10的-6TCID50。当细胞出现75%以上的病变时,收获细胞并快速进行3次冻融处理。接着,用超声波进行10分钟的处理,1000g进行离心处理,然后弃去细胞碎片。将HCMV悬液接种在血平皿中,在温度为37℃下培养48小时,直到确认无细菌生长。将病毒悬液放置于距离为20厘米的2个15瓦紫外线灯下加照12分钟,灭活病毒悬液。接着,用小块无菌医用明胶海绵吸取灭活病毒悬液后,经阴道直抵宫颈放置于雌性2个月龄KM小鼠内。每周3次,共8周。经过光镜检测发现,小鼠宫颈上皮增生,出现明显的鳞状细胞浸润,小鼠宫颈可连续发生从正常宫颈上皮变成异型性上皮,再演变到浸润癌的病理组织学变化。
(2)模型特点 通过将灭活的HCMV病毒悬液使用小鼠进行多次接种感染后,可诱发小鼠宫颈上皮细胞不典型增生及浸润癌。小鼠宫颈癌组织中HCMV抗原阳性率达到100%,病毒感染后的小鼠血清中HCMV抗体滴度达到1:167。HCMV接种小鼠的淋巴细胞出现ANAE阳性率降低的现象,提示HCMV诱癌过程中,小鼠的细胞免疫功能受到严重影响。该模型适合用于研究HCMV诱癌机理。
(3)比较医学 与HSV-2感染小鼠宫颈的情况类似,通过HCMV反复感染小鼠宫颈可诱发小鼠宫颈连续发生从正常宫颈上皮变成异型性上皮,再演变到浸润癌的组织病理变化。因此,该模型也可用于对HSV诱癌机制的研究。
北检院部分仪器展示