1系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型一

【操作步骤】(1)选取低龄SD大鼠进行实验，麻醉后取胸腺并挤出胸腺细胞，经过过滤排除混杂的组织，制备出淋巴细胞悬液并调整至10的11次方/ml。(2)使用卡介苗预致敏的新西兰兔，通过多次免疫产生满意效价的抗Thy-1抗体血清，对150g左右的雄性SD大鼠进行尾静脉注射，每周注射1次，共进行4周。取肾脏进行检查。(3)通过PAP法免疫组化测定抗体效价，检测低龄大鼠肾小球系膜细胞表面的Thy-1抗原。注射抗Thy-1抗体后，通过时间观察肾小球系膜细胞的变化。

【结果分析】实验结果表明，Thy-1抗原是大鼠肾小球系膜细胞表面的糖蛋白，使用Thy-1抗原可以诱发肾小球系膜细胞病变。注射抗Thy-1抗体后，30分钟内系膜细胞就出现变性，胞浆发黑、细胞皱缩；2小时后大部分系膜细胞溶解，但内皮细胞及肾小球基底膜常完整无损；24小时后溶解的系膜区可呈瘤样扩张，伴随中性粒细胞、血小板及纤维蛋白的聚集。2～4天主要是中性粒细胞浸润的过程，8天左右可见系膜细胞及基质呈节段性增生，单核细胞浸润减轻。18天后出现血管重建，白细胞浸润消失，系膜溶解瘤样损伤迅速恢复。30～45天后肾小球结构已基本恢复正常，但可伴有局灶节段性肾小球硬化，有时可见胶原纤维残留的局灶性系膜增生现象。病变4天左右可出现一过性的蛋白尿高峰，逐渐减少，约3周左右蛋白尿消失。

抗Thy-1抗体肾炎模型的特点包括受试大鼠仅有异体抗体相，即注射异体抗Thy-1抗体后，产生系膜溶解及迅速的修复过程，病变呈一过性；系膜细胞损伤过程为补体依赖性，用蛇毒消除补体后，不影响抗Thy-1抗体与系膜细胞结合，但可减轻和阻止系膜细胞损伤和溶解过程；病变过程有白细胞、血小板聚集的炎症反应；修复过程迅速，30～45天内病变几乎完全修复，说明系膜细胞有较强的修复能力和血管重建能力。

2系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型二

【操作步骤】(1)选取成年BALB/c雄性小鼠10只，摘除眼球后取血制备BALB/c小鼠血清IgG并用弗氏完全佐剂充分混合。(2)将BALB/c小鼠血清提取的IgG注入180～200g的Wistar雄性大鼠两后脚掌及背部皮下，共进行2周的免疫，然后使用单克隆抗体1-22-3500μg舌下静脉注射大鼠。在注射后的1、2、3、4、5、6、7、9、11、13、15天内每天24小时收集大鼠的尿液，通过尿蛋白定量测定进行检测。(3)在注射单抗后的第2天和第6天通过病理检测进行观察。

【结果分析】通过实验观察发现，Wistar大鼠肾小球系膜细胞在注射单克隆抗体1-22-3后发生明显的病理变化。注射单抗后很快出现一过性的大量蛋白尿，第6天达到高峰，之后逐渐下降。在系膜溶解期(注射单抗后2～4天)，肾小球细胞数量减少且形态不规则，系膜细胞溶解、核固缩的同时仍有系膜细胞增生；在系膜增生期(注射单抗后4～6天)，系膜细胞增生，肾小球内细胞数量增多，形态也不规则。经过以上的病理变化，这一模型也被成功地用于系膜增生性肾小球肾炎的研究。

北检院部分仪器展示