(1) 复制方法

研究人员使用年龄为3～6岁的健康恒河猴和食蟹猴，按照0.15毫升/千克体重的剂量通过肌肉注射速眠新麻醉，在感染SARS-CoV BJ01株(10的5.7次方TCID50/ml)之前进行预处理。感染后，在攻毒后第2、5、7日可从咽拭子中分离出SARS病毒，并进行免疫荧光鉴定。模型动物的肺部出现出血现象或出血斑点。所有感染猴均出现不同严重程度的多灶性单核细胞性间质性肺炎，即肺泡间隔增宽、出血、渗出，肺泡腔内有脱落的肺泡上皮细胞和巨噬细胞，小支气管和细支气管也有上皮细胞脱落。同时，部分肺泡间隔出现少量以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润，肺泡腔内偶见透明膜形成。经免疫组化检测，SARS病毒抗原可在肺泡巨噬细胞和Ⅰ型上皮细胞中检测出来。感染猴的尸检中，在支气管淋巴结和心肌中也能检测到病毒RNA，并且具有炎症改变。部分感染猴出现多灶性淋巴细胞性感染为主的肝炎，并伴有个别肝细胞坏死。

(2) 模型特点

模型动物感染后的病理学改变，表现在肺脏方面，这是SARS冠状病毒感染的主要靶器官，各个肺叶均出现弥漫性肺泡损伤，形成透明膜，并有单核细胞浸润。通过病毒学检测和免疫学方法，可以在模型动物的血液，咽拭子，肺泡上皮细胞和支气管淋巴结等组织样品中检测到SARS病毒RNA，表明该病毒能够在非灵长类动物体内进行复制，并且存在机体液和细胞免疫响应。部分感染猴的白细胞和血小板数量从感染3天开始出现一过性降低，然后逐渐恢复到正常水平。感染动物同时生成了SARS病毒的专一性抗体。感染后第2、3、4周的血清抗 SARS-CoV特异性抗体水平均较高。因此，恒河猴可作为SARS病毒感染的动物模型，可以应用于SARS发病机制、药物筛选和疫苗评价等研究。

(3) 比较医学

虽然所有感染猴均未表现出典型的SARS临床症状，如高热、干咳、昏睡、一过性的皮疹和呼吸困难等，但其中2/3的恒河猴出现了一过性的低热。同时，所有感染猴的体温均在正常范围内波动。然而，感染猴的肺部组织病理变化与人类感染SARS冠状病毒后的肺组织病变基本相似，而且病理变化较人类轻。在感染后的4周左右，模型动物体内可产生SARS专一性抗体，血清中的抗体水平较高，这与SARS患者的情况相似。SARS患者身体内产生的特异性IgM抗体，从感染后7天开始逐渐出现，到第11天时达到高峰；而IgG抗体在第10天开始生成，至第20天达到高峰。与此同时，病毒也从感染猴的组织和分泌物中分离出来。总之，恒河猴感染SARS病毒的病理学改变与人类SARS感染后出现的病理改变十分相似，而且非人类灵长动物具备与人类相似的遗传背景，因此成为较为理想的SARS动物模型。但是，因为客观条件的限制，猴无法在大规模研究中使用，降低了该模型的应用价值。

北检院部分仪器展示