乳酸脱氢酶诱导颞下颌关节骨关节病动物模型
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(1)原创方法 基于先前的研究,我们进行了一些修改,以获得更好的动物模型。我们选用体重2.0-2.5kg、无牙颌畸形的雌性成年新西兰兔,通过耳缘静脉注射2.5g/L的戊巴比妥钠麻醉,这是一种常用于动物麻醉的药物。然后在双侧颞下颌关节上腔穿刺,注射不同剂量的兔乳酸脱氢酶(LDH)溶液。低浓度组注射100U LDH,高浓度组注射200U LDH,注射完毕后进行观察。穿刺时,我们在兔子外眦后下方可扪及的两个小结节之间进针,针头指向前、内、下,进针约0.5cm即可成功。当针尖进入关节腔内时,会有脱空感,并有少量黏稠淡黄色关节液回抽,证明注射成功。
(2)模型特点 我们的动物模型确保了在不同时间段的关节病变程度均有所不同。我们找到了注射不同剂量的兔乳酸脱氢酶溶液与病变程度之间的关系。进一步观察表明,在光学显微镜下,早期(1-4周)没有出现明显的病变。在后期(4-12周),纤维软骨层变薄,纤维软骨各层结构排列紊乱,关节盘胶原纤维玻璃样变性,滑膜增厚细胞成分增多,部分区域骨质暴露,髁突部分区域骨质变性,关节盘胶原纤维变性,断裂。在扫描电镜下,早期关节各结构表面没有明显异常,但后期关节盘表面波纹变浅,凝胶层剥脱,网状胶原纤维丝暴露,大量胶原纤维束卷起裸露,在髁突前斜面功能区,波纹结构消失,凝胶层变薄。综上,我们的动物模型可以适用于中、后期关节病变的实验研究。
(3)比较医学 通过病理组织学、扫描电镜等研究手段,我们观察了模型动物各时间段关节软骨关节盘病变,发现病变损伤与其他方法如肿瘤坏死因子(TNF)、牙合创伤等引起的关节损害相似。这表明我们的动物模型制作方法具有良好的可比性,符合动物模型的基本要求。由于未观察到模型动物的关节盘有穿孔现象,说明本模型的关节病变处于早、中期。因此,我们所建立的动物模型适用于早、中期关节病变的实验研究。虽然本方法诱导的兔TMJ OA模型价格适中,但病变典型,制作方法简便易行,因此是较为理想的动物模型。
北检院部分仪器展示