牵张成骨增高牙槽嵴动物模型
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(1) 原创方法 为了研究下颌骨牵张成骨对颞下颌关节的影响,我们选择了体重在10至15公斤之间、牙齿完好并无颞下颌关节紊乱的雄性比格犬。在动物术前12小时禁食不禁水的情况下,以15毫克/公斤的速眠新剂量进行肌肉注射麻醉,并建立口腔插管及静脉通路。在桡侧外静脉通路下给予戊巴比妥钠2毫克/公斤的剂量,并按照实际情况酌情加药。接下来,我们进行常规消毒和每5分钟注射12%利多卡因加1滴肾上腺素局部麻醉。随后,我们通过切开第一前磨牙到第一磨牙的唇颊侧牙龈,分离牙龈,并首先拔出第一磨牙,然后依次拔出其余的牙齿。之后进行牙槽骨修整,缝合黏膜。我们同样采用相同方法拔除对侧所有前磨牙和第一磨牙。在术后的三天内每天给予头孢唑林1克的肌肉注射,并饲喂软食。在拔牙后一个月,我们选择在一侧下颌后牙区前庭沟底偏颊侧切开黏膜,分层切开至下颌骨下缘,向上剥离骨膜。之后,在下颌管以上做长为4厘米的矩形截骨,通过细裂钻切开颊侧骨皮质,通过薄骨刀涂抹,横行截骨线在克式针钻孔后保留部分舌侧骨皮层。在横行截骨线两侧预定距离钻孔,两孔间距8毫米,每只放置两个牵张装置,固定可靠后分层缝合,并将其完全埋置。另一侧下颌骨不做处理,作为对照组。我们术中尽量保存截骨块的骨膜附着,以保持血供。术后常规给予抗生素,并喂食软食。模型动物在预定的实验终止日处死,切取双侧关节标本,并置放于甲醛固定液中固定。随后进行甲酸脱钙操作,作为常规组织切片,进行HE染色,并进行镜下观察。
(2) 模型特点 对于牵张后1个月、3个月和6个月的模型动物,我们肉眼观察到两侧髁状突和关节盘均未出现明显的破坏、粘连或吸收等现象。在镜下组织学观察方面,1个月后的模型动物双侧髁状突表面均被关节软骨覆盖,并且表面光滑。关节表面带、增殖带、肥大带和钙化软骨带四层的层次清晰,其中关节表面带具有5至8层的纤维细胞,增殖带中显示有丝分裂的小细胞,肥大带中含有3至5层的软骨细胞,而钙化软骨带内可见到钙化。
(3) 比较分析 以往的研究表明,在下颌骨牵引过程中,牵引器牵引近中、远中骨段,根据牵引方式的不同,近中骨段移位的方向不同,但会使髁状突受到压力。如果这种压力在组织的承受范围内,关节会产生可逆的适应性变化。但如果压力过大,则关节会产生不可逆性变化,从而引发各种关节疾病。我们拔除双侧下颌所有的前磨牙和第一磨牙,建立下颌部分无牙颌模型,并在牙槽嵴牵张成骨过程中,对照侧关节无变化,而牵张侧关节发生了轻微可逆的变化。在两侧其他实验条件相同的情况下,这表明着牙槽嵴牵张成骨对颞下颌关节具有一定的影响。此外,安放牵张器后,镍钛记忆合金需恢复形变,从而对上下骨段产生持续的压力。尤其是下段骨,虽然没有肉眼可见的明显位置变化,但是长期的压力作用会使关节周围的肌肉、关节囊等细微变化,进而影响到髁状突和关节盘,产生变化。此外,以犬作为实验动物来观察关节的变化,犬的主观指征(如疼痛)无法记录,无法确定精神、心理因素对本实验的影响。值得一提的是,拔牙后及放置牵张器后两周内,犬的精神和饮食均不佳,体重下降,这说明手术创伤和摄食不适对犬的情绪具有一定的影响。在牵张后3个月,牵张侧髁状突表面的凝胶状物变薄了,部分胶原纤维暴露了出来,6个月后基本恢复正常,这说明牙槽嵴牵张成骨早期对关节的影响是轻微可逆的。
北检院部分仪器展示