心脉淤阻证贵州小型猪模型
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近年来,冠心病心肌缺血动物模型已经得到广泛应用。大多数研究采用鼠、兔等小型动物和犬制作模型,但是犬的侧支血管网变异较大,对于研究冠状动脉侧支循环对于缺血心肌的影响存在弊端。因此,人们目前更多地选择以猪为动物模型进行研究。猪的血液循环系统分布走向与人类的循环系统非常相似。在中医研究中,还没有理想的动物模型,可以结合“胸痹”、“心痛”的病证進行研究。本研究的目的是探讨制作贵州小型猪病证结合模型,研究“胸痹”、“心痛”等病证。
(一) 实验方法
将15头贵州小型猪随机分为3组:假手术对照组、模型组和针刺组,每组5头。使用开胸结扎冠状动脉前降支经典方法制作模型,并对针刺组进行关穴埋针处理,然后进行正常饲养7天。观察制作模型前后小型猪心电图的变化,观察针刺前后缺血区域血管侧支循环开放和血管生成情况,观察心肌缺血边缘心肌血管面密度,并检测心肌核转录因子-kB(NF-kB)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达。同时,利用光学和电子显微镜观察心肌组织内微血管密度和数量的变化。
(二) 实验结果
与假手术对照组相比,模型组的动物表现出明显的淤血体征,心电图显示心率变慢,ST段移位等。结扎前,各组猪的STⅡ值差异不愧有显著性(P>0.05)。结扎后,各组STⅡ值均有不同程度的下移,与结扎前有非常显著的差异性(P<0.01)。针刺组与模型组相比,全血黏度升高(P<0.05),红细胞压积(HCT)升高(P<0.05);针刺组与假手术组相比,全血黏度、红细胞压积(HCT)均无显著性差异(P>0.05)。
光学显微镜的结果显示,假手术组心肌纤维染色均匀,排列整齐有序,心肌横纹可见,毛细血管丰富。而模型组心肌纤维则出现灶性出血、水肿、局部横纹消失,大部分可见心肌细胞坏死,心肌间质大量炎性细胞浸润,红细胞溶解。而针刺组的心肌纤维排列整齐有序,深染减少,毛细血管增多,均匀一致。透射電鏡的结果显示,假手术组肌丝排列较整齐,血管丰富,组织有轻度水肿,线粒体结构稍模糊。模型组组织水肿严重,结构松散,肌丝排列较紊乱,血管相对较少。而针刺组只有局部轻度水肿,肌丝排列整齐规则。
实验结果还显示出,模型组与假手术组相比,NF-kB和ICAM-1的灰度值均有所降低;模型组与针刺组相比,NF-kB和ICAM-1的灰度值也有所下降;而针刺组与假手术组的NF-kB和ICAM-1的灰度值差异不大。
通过本实验可以得知,使用冠状动脉左前降支结扎的方法可以成功制作心脉淤阻证“胸痹”、“心痛”动物模型。本方法以中医基本理论为指导,符合中医相关病因病机理论,较其他方法更接近临床与中医理论;并应用现代先进的科学技术手段及仪器,从不同层次、不同角度进行更深入的系统研究,且有较高的重复性、可靠性,同时具有较高的实用性和科学性。毕竟,贵州小型猪的心血管系统更接近于人类,同时小型猪的耐受性强、反应均衡,便于各种参数的检测,可以用于中药现代化研究的更广泛范围内的应用。
北检院部分仪器展示