霍乱弧菌感染模型被广泛应用于疾病研究。2007年，Olivier等人使用5周龄C57BL/6小鼠建立了可靠的霍乱弧菌感染模型。该模型使用链霉素抗性的菌株，在小鼠体内引发感染，为研究霍乱弧菌的发病机理提供了有力的支持。

一、霍乱弧菌菌株

在该实验中，使用链霉素抗性的霍乱弧菌。将霍乱弧菌的培养物用含有100mg/ml链霉素的LB培养基稀释，然后在30℃培养至对数中期，或者OD600达到0.5左右。收集细菌，用PBS洗涤两次，得到菌悬液。

二、感染方法

将4～5周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠(也可使用BABL/c小鼠)自由饮用链霉素溶液(1mg/ml)4～7天，并在感染前一天禁食，但不禁水。在感染操作时，小鼠腹腔注射氯胺酮(60～70mg/kg体重)和甲苯噻嗪(12.5mg/kg)麻醉，随后用50μl的8.5％的碳酸氢钠灌胃并立即用22G的灌胃针在胃中注入50μl的霍乱弧菌悬浮液。

三、病原检测

将小鼠感染后的小肠、盲肠和大肠采集下来，将小肠切为近端、中端和远端三段，然后将所有的器官在PBS中匀浆。梯度稀释后涂布到LB平板上培养，从而得到菌落并计算菌落数。

四、模型鉴定

在该模型中，小鼠感染后1小时内，霍乱弧菌即可到达小肠的近端，3小时后到达小肠的中端，6小时后到达小肠的远端。在感染后的3～6小时内，小肠的中端和远端的霍乱弧菌数量达到高峰，超过感染剂量，并在感染后12小时达到复制的最高峰。随后，小肠内的霍乱弧菌数量开始降低，数目达到接种量的千分之一，并在72小时内维持稳定。

在该模型中，使用10的8次方的感染剂量可达到100％的致死率，小鼠感染后24小时内便开始死亡。当感染剂量降低时，小肠内的细菌在12小时内便被清除完全，而盲肠与大肠中的细菌在72小时内被清除完全。

在感染后12小时，使用10的7次方cfu野生型V.cholerae感染小鼠(非致死量)，可导致严重的组织坏死。进行病理HE染色可观察到感染小鼠末端小肠腔内坏死细胞沉积，如下图所示:

北检院部分仪器展示