Hp诱发慢性胃溃疡动物模型
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(1)复制方法
该模型使用BALB/c小鼠或蒙古沙土鼠(MG),5-8周龄,进行Hp胃溃疡的复制。先禁食12h后麻醉开腹,然后将带有腐蚀性药物的2号手术棉线(置于15%石炭酸和25%醋酸溶液中浸泡)横穿于胃壁,两针点孔相距1~1.5rnrn,剪断棉线,按手术要求关闭腹腔,缝合皮肤。次日,禁食12h和腹腔注射雷尼替丁0.25mg/只后4h,灌胃经微生物学和PCR鉴定的Hp菌液14×100000000CFU/只。之后,在不同的时间点颈椎脱臼处死,取胃窦部黏膜,匀浆,进行细菌克隆生长观察,行尿素酶和PCR鉴定,取部分胃黏膜组织进行光镜和电镜检查。其他方法包括灌胃乙醇或消炎痛等药物,以促进Hp定植和复制。
(2)模型特点
胃大弯窦部黏膜下挂上带腐蚀性药物的棉线2周时,模型小鼠的胃窦部出现溃疡,直径在1~2.5mm等,局部胃黏膜腺体缺损,有纤维索性物质渗出,黏膜下可见炎症细胞浸润。在经过Hp条件培养基培养3d后胃黏膜可见乳白色菌落生长,其菌苔尿素酶试验呈阳性,PCR反应显示有特异性的DNA扩增条带。72d时,电镜观察发现胃黏膜有带鞭毛的螺杆菌。在灌胃乙醇或消炎痛等药物后,模型小鼠胃黏膜可见大量炎症细胞浸润,黏膜层和黏膜下层有大量淋巴滤泡形成,约1/3动物胃窦部可看到胃溃疡的出现。此模型在Hp感染后引发的胃黏膜病变、淋巴滤泡形成及胃溃疡等方面具有较高的模拟效果。
(3)比较医学
本模型胃溃疡的复制方法可应用于对Hp相关胃病的研究。研究发现,Hp感染与胃溃疡的形成和发展有着密切的关系。Hp对胃型上皮有着某种亲和力,可快速穿透上皮细胞间的紧密连接,致使黏膜内炎症细胞浸润,表面上皮细胞破坏,黏膜抵抗力下降。同时,Hp释放的细胞外蛋白酶也会对黏液糖蛋白的聚合结构进行裂解,使黏蛋白不能形成胶体,破坏了黏膜屏障的完整性。此外,Hp分泌的大量尿素酶,可快速分解尿素产生多量的氨,导致胃黏膜细胞周周环境改变,pH升高,最终促进胃溃疡的形成。相比将人类自然感染Hp者定植到小型实验动物体内,本模型使用灌胃方法定植Hp更为容易,对于研究Hp相关疾病起到了重要的推动作用。
北检院部分仪器展示