信息概要

自噬流测试是一种用于评估细胞自噬过程动态变化的检测方法，通过量化自噬标志物如LC3-II和p62的转化率，来监测自噬体的形成、运输和降解全过程。自噬是细胞维持稳态的关键机制，与癌症、神经退行性疾病和感染等病理过程密切相关。检测自噬流对于药物筛选、疾病机制研究和治疗策略开发至关重要，能够提供准确的自噬活性指标，帮助优化实验设计。概括来说，该服务确保自噬评估的可靠性和重复性，为生物医学研究提供支持。

检测项目

LC3-II水平，p62降解率，ATG5表达量，ATG7活性，Beclin-1浓度，ULK1磷酸化水平，mTORC1活性，AMPK磷酸化，自噬体计数，自噬溶酶体数量，LC3 puncta形成，GFP-LC3切割，SQSTM1积累量，LC3-II/LC3-I比值，自噬流速度，溶酶体酶活性，cathepsin B水平，LAMP1表达，TFEB定位，自噬基因mRNA水平，自噬抑制剂IC50，自噬诱导剂EC50，细胞活力，凋亡细胞比例，ROS水平，线粒体膜电位，ER stress标记，脂滴含量，糖原水平，病毒载量，细菌清除率，选择性自噬受体表达，chaperone-mediated自噬效率，microautophagy指数，macroautophagy通量，自噬持续时间测定，自噬效率计算，蛋白聚集物清除

检测范围

HeLa细胞，HEK293细胞，MEF细胞，神经元细胞，肝细胞，心肌细胞，癌细胞系，干细胞，原代细胞，动物组织，人体组织，小鼠模型，大鼠模型，斑马鱼，果蝇，线虫，酵母，植物细胞，细菌感染模型，病毒感染模型，肿瘤样本，脑组织，肝脏组织，心脏组织，肾脏组织，肺组织，血液样本，尿液样本，细胞培养上清，组织切片，活体成像样本，体外培养系统，3D细胞培养，类器官，器官芯片，微生物样本，转基因模型，疾病模型，药物处理样本

检测方法

Western blotting：用于检测自噬相关蛋白的表达和修饰水平，如LC3-II转化

免疫荧光染色：通过抗体标记可视化自噬体形成和细胞内定位

流式细胞术：定量分析细胞群体中自噬标志物的荧光强度

电子显微镜：观察自噬过程的超微结构细节，如自噬体形态

荧光显微镜：实时监测活细胞中自噬相关探针的动态变化

qRT-PCR：检测自噬基因的mRNA表达水平，评估转录调控

ELISA：定量测定自噬蛋白的浓度，提供高灵敏度检测

活细胞成像：动态跟踪自噬流过程，使用时间序列分析

溶酶体染色：利用染料评估溶酶体功能和完整性

pH敏感性探针：测量溶酶体内部pH值变化，指示自噬降解活性

蛋白降解 assay：通过放射性或荧光标记测定长寿命蛋白降解率

自噬抑制剂处理：应用药物如氯喹评估自噬抑制效应

自噬诱导剂处理：使用雷帕霉素等诱导自噬，观察响应变化

基因敲除技术：通过CRISPR等方法研究特定基因对自噬的影响

质谱分析：鉴定自噬相关蛋白的互作网络和修饰位点

高通量筛选：利用自动化平台大规模评估自噬调节化合物

细胞活力检测：通过MTT或CCK-8法评估自噬对细胞生存的影响

检测仪器

流式细胞仪，共聚焦显微镜，电子显微镜，荧光显微镜，Western blot成像系统，qPCR仪，ELISA阅读器，活细胞成像系统，离心机，培养箱，超净工作台，分光光度计，质谱仪，微孔板阅读器，细胞计数仪，蛋白电泳系统，成像分析软件，pH计，酶标仪，细胞培养箱，显微镜摄像头，低温离心机，电泳槽，转膜装置，化学发光检测仪

荣誉资质

北检院部分仪器展示