信息概要
受体二聚化影响检测是针对细胞信号转导过程中受体蛋白二聚化现象及其功能效应的分析服务。受体二聚化是许多生物过程的核心机制,如G蛋白偶联受体(GPCR)或酪氨酸激酶受体的活化,其异常可能导致疾病(如癌症、免疫紊乱)。检测重要性在于评估药物靶点有效性、筛选抑制剂或激动剂,以及研究细胞通路机理。本检测概括了二聚化程度、动力学及对下游信号的影响。
检测项目
二聚化亲和力, 二聚化动力学常数, 二聚体稳定性, 受体结合位点分析, 二聚化诱导的构象变化, 二聚化对信号转导的影响, 二聚化抑制剂效应, 二聚化激动剂效应, 二聚化温度依赖性, 二聚化pH依赖性, 二聚化浓度梯度分析, 二聚化时间进程, 二聚化可逆性评估, 二聚化特异性验证, 二聚化与疾病关联性, 二聚化细胞定位, 二聚化荧光共振能量转移(FRET)效率, 二聚化生物发光共振能量转移(BRET)效率, 二聚化表面等离子体共振(SPR)响应, 二聚化免疫共沉淀分析
检测范围
G蛋白偶联受体(GPCR)二聚化, 酪氨酸激酶受体二聚化, 细胞因子受体二聚化, 核受体二聚化, 离子通道受体二聚化, 免疫受体二聚化, 生长因子受体二聚化, 神经递质受体二聚化, 激素受体二聚化, 孤儿受体二聚化, 跨膜受体二聚化, 细胞内受体二聚化, 同源二聚化, 异源二聚化, 多聚化受体复合物, 受体二聚化在癌细胞中的表现, 受体二聚化在神经元中的表现, 受体二聚化在免疫细胞中的表现, 受体二聚化在干细胞中的表现, 受体二聚化在组织样本中的表现
检测方法
荧光共振能量转移(FRET):通过荧光标记检测受体间能量转移以评估二聚化距离和效率。
生物发光共振能量转移(BRET):利用生物发光蛋白和荧光蛋白的能量转移测量二聚化动态。
表面等离子体共振(SPR):实时监测受体结合和二聚化动力学参数。
免疫共沉淀(Co-IP):通过抗体沉淀分析受体二聚化复合物的形成。
双杂交系统:如酵母双杂交,检测受体蛋白间的相互作用。
荧光相关光谱(FCS):分析受体在细胞膜上的二聚化扩散行为。
单分子成像:直接观察单个受体二聚化事件。
圆二色谱(CD):评估二聚化引起的构象变化。
等温滴定量热法(ITC):测量二聚化过程中的热力学参数。
动态光散射(DLS):分析受体溶液中二聚化的大小分布。
Western blotting:检测二聚化产物的分子量变化。
流式细胞术:高通量分析细胞中二聚化水平。
酶联免疫吸附测定(ELISA):定量检测二聚化复合物浓度。
核磁共振(NMR):解析受体二聚化的原子级结构。
X射线晶体学:确定二聚化受体的三维结构。
检测仪器
荧光显微镜, 微孔板读数器, 表面等离子体共振仪, 等温滴定量热仪, 圆二色谱仪, 动态光散射仪, 流式细胞仪, 核磁共振波谱仪, X射线衍射仪, 共聚焦显微镜, 蛋白质纯化系统, 离心机, 光谱仪, 酶标仪, 高效液相色谱仪
问:受体二聚化影响检测通常用于哪些疾病研究?答:常用于癌症、神经退行性疾病和自身免疫病的研究,帮助开发靶向药物。
问:检测受体二聚化时,FRET和BRET方法有何区别?答:FRET使用外部光源激发荧光,而BRET依赖生物发光,后者背景噪声更低,适合活细胞检测。
问:如何确保受体二聚化检测的特异性?答:通过对照实验、突变体验证和多种方法交叉确认,减少假阳性。