小型猪胰十二指肠移植研究

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1.实验方法

(1)实验动物:本次实验采用封闭群小型猪40头,供体体重为16.5~21.5kg,受体体重为17.0~23.5kg。供受体随机配对,雌雄不限。

(2)供体手术:在麻醉成功后进行常规消毒和铺巾,取腹部正中直切口,从剑突上方一直到耻骨联合,以显露腹腔内脏器。接着提起胃,反转大网膜,分别切断胃左血管、胃网膜左和胃短的血管以及胃右血管和胃网膜右血管,还需分离结扎胃后壁与胰腺间的小血管,并切除全胃。随后以脾动脉为标志,逐步游离至腹腔干,然后解剖肝十二指肠韧带,结扎肝固有动脉,在十二指肠上缘切断胆总管,最后沿着门静脉分离周围组织,结扎小血管及淋巴管,完整显露门静脉直达肝门部。然后,切开十二指肠右侧和下部后腹膜,锐性分离横结肠韧带,显露肠系膜上动、静脉,并结扎肠系膜上动、静脉,以及双肾及脾赃血管。在靠近腹主动脉分又处插管,远端结扎。在阻断腹腔干上方腹主动脉的同时, 远端插管处灌入4℃ UW液,压力为80~100cmH2O(10.7kPa)。当灌注至供胰十二指肠表面温度明显降低,颜色变白,门静脉分叉处有淡血性灌注液流出时,将灌注速度减慢。接着沿腹主动脉灌注端向上分离,切断结扎双肾血管,把带有腹主动脉、门静脉肠系膜血管主干的胰十二指肠、脾脏整块取出。

(3)移植物的保存和修整:将移植物取出后浸入装有冷冻保存液的无菌不锈钢盆内,结扎腹主动脉近心端及腰动脉断端,修剪、去除腹主动脉、门静脉及肠系膜血管旁多余组织及淋巴结,修剪腹主动脉远心端及门静脉断端以供吻合。接着再次进行低压冷灌注,注意检查胰周有无渗漏,结扎或缝扎胰腺周围渗漏的小血管,修整后的移植物浸入装有UW液的无菌塑料袋内,存放在4℃冰箱内冷保存备用,保存时间3小时以内。

(4)受体手术:取腹部正中切口,游离并切除全胰。暴露肾动脉分又下方腹主动脉及下腔静脉,用5-0无损伤缝线将移植物的门静脉与受体下腔静脉端侧吻合,移植物腹主动脉与受体的腹主动脉端侧吻合,供体的十二指肠与受体的空肠侧侧吻合。在血管吻合之后,将移植物无张力固定于侧下腹腔,并观察移植物血供良好后关腹。吻合过程中,移植物会使用纱布冰袋套进行保护。

2.实验结果 在移植物术后的正常存活期内,实验结果显示血糖和胰岛素均正常。但是在术后第9天,血糖和血清淀粉酶急剧增高,而胰岛素显著减少。

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