大鼠脊髓半横断损伤模型的建立及行为学评价

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一、实验目的

脊髓损伤是一种严重的神经系统创伤,对其的治疗一直是医学研究的难点和热点。为了有效地评估SCI后的干预措施效果,需要建立适合的动物实验模型。半横断脊髓损伤模型在SCI的研究中被广泛使用。本实验旨在制备大鼠半横断脊髓损伤模型,研究其后肢运动功能的变化,为SCI的研究提供基础。

二、实验原理

有效的动物模型是SCI修复研究的基础。半横断脊髓损伤模型在SCI研究中被广泛使用,它不仅包括SCI的特征,而且保留了部分运动功能。行为学评分法几乎包括SCI后大鼠后肢恢复过程中的所有行为变化,是SCI程度检测的敏感方法,可区分脊髓损伤大鼠运动功能的微小差异。

三、实验材料与方法

(一)实验动物与分组

本实验选用20只体重为(250±5)g的成年雌性SD大鼠,随机分为假手术组(n=10)和半横断脊髓损伤组(n=10)。

(二)实验方法

1.制备半横断脊髓损伤模型:对SD大鼠使用3.6%水合氯醛经腹腔注射麻醉(10ml/kg),固定在手术台上。进行切口、暴露脊髓、剪断脊髓等操作,制作半横断脊髓损伤模型。对比假手术组仅进行椎管打开操作。术后注射青霉素和膀胱排尿使大鼠逐渐康复。

2.行为学评分法(BBB评分):观察记录大鼠在不同时间点的后肢运动功能。将大鼠放置于木床上观察运动,评分并记录。

(三)统计学分析

使用SPSS17.0对数据进行正态性检验,采用t检验比较两组大鼠BBB评分的差异,结果P<0.05表示差异具有统计学意义。

四、实验结果

实验前,大鼠BBB评分均为21分。术后,假手术组大鼠双侧后肢运动功能均为21分。半横断脊髓损伤组大鼠在短时间内左侧下肢功能严重受损后肌力为零,随着时间的推移,左侧后肢开始挛缩,右侧下肢活动正常。术后7d、14d、21d、28d检测,半横断脊髓损伤组左后肢BBB评分显著低于假手术组(见表2-1)。

五、结果分析

BBB评分表明,假手术组大鼠脊髓未受损伤,后肢运动功能未受影响,BBB评分均为21分。半横断脊髓损伤组大鼠由于脊髓损伤左侧后肢运动动力学完全丧失之后,在一定程度上通过代偿恢复了其运动功能,但仍较假手术组低。实验表明,成功地制备了大鼠半横断脊髓损伤模型,并表明脊髓半横断损伤后存在一定的自我修复能力。

六、经验与体会

实验中,需要轻柔地进行动作,确保手术的成功。术后护理需严格执行,保暖、营养、防止自残、压疮、感染等,以提高动物存活率。为保证BBB评分结果的准确性,需要尽量减少主观因素的影响,采用单盲法,由3名独立的观察者完成评分。

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