帕金森病啮齿类动物模型的行为学评价方法

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 一、自主活动计数

自主活动计数是对实验动物活动范围和次数进行客观检测的方法。为了更准确地监测,可以参照Kawai的测试方法,在自制30cm×30cm×15cm的有机玻璃盒里,底部刻出6cm×6cm的格子,在安静、光线较暗的环境中检测。动物适应环境10min后,计数5min内树鼩移动的格子数和站立的次数,连续测5次,取平均值。

二、滚轴实验

滚轴实验是关注动物运动协调性的一种方法,可以采用直径为6cm、转速为20r/min的滚轴进行测试。为了更准确地监测,建议动物在适应5次后,每次检测间隔1min,连续测5次,取平均值。

三、爬杆实验

爬杆实验是用于测试树鼩协调运动和平衡能力的一种实验,可以参照Ogawa的测试方法进行。建议制作高60cm,直径18cm的木杆,顶部有一小木球,外面覆盖纱布以防止鼠打滑。每次记录动物从开始运动到完全转为头向下的时间和它们下到杆底的时间,每次检测间隔l min,连续测5次,取平均值。

四、悬挂实验

悬挂实验是用来评估动物肌肉力量和耐力的一种实验。可以参考Kuribara的测试方法,在自制的有机玻璃悬挂实验箱中,树鼩悬挂于直径115mm、距地面30cm的金属杆上,记录落地前的时间,并按下述标准评分:0~4s评0分,5~9s评1分,10~14s评2分,15~19s评3分,20~24s评4分,25~29s评5分,超过30s评6分。每次检测间隔1min,共检测5次,取平均值。

五、变异系数

变异系数是对所测行为的稳定性进行比较的方法,可以计算每只树鼩5次检测结果的变异系数(coeffcient of variation, cv),并求出每种检测方法10只树鼩所得变异系数的x-和s,进行行为学检测方法间的比较。在每种检测方法中按顺序计算10只树鼩第1~5次检测结果的x-和s,反映第1~5次检测结果的变化趋势。

六、旱迷宫实验

旱迷宫实验是评估啮齿类动物空间记忆和学习能力的方法。为了更准确地进行测试,可以先让动物探索在板子上留下的臭迹,并适应新的实验器材。之后进行10个实验期的检测,每期连续5天,中途有2天的间隔,每个实验期包括4个视觉空间和1个空间实验。每次实验间隔10min,最长检测90min。进行视觉空间实验时,可以用胶带标记5个新的随机顺序的孔,并放置小块杏仁作为诱饵。将洞板放入笼子,直到动物访问完所有配备诱饵的洞。在此配备诱饵,并再次放回笼子进行测试。进行空间实验时,孔盖上的标志被移走。计数孔的数量和记录动物访问孔的顺序,直到访问完5个装有诱饵的孔。观察动物花费的时间,旨在检测判定3种PD模型制备后啮齿类动物空间认知能力的变化情况。

利用以上定量行为学观察法可以更加客观地评估帕金森病啮齿类动物模型行为学的研究,同时也提高了整个实验的可靠性和准确性。

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