MOG诱导的慢性EAE模型

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(1)实验动物:本实验选用了8-10周龄的BN大鼠,并使用重组鼠髓鞘少突细胞糖蛋白(rrMOGIgd)。

我们按照以下方法免疫:先将50μg的rrMOGIgd溶解在100μl的磷酸盐缓冲液(PBS)中,再与100μl灭活的结核杆菌混合,制成乳剂。然后将乳剂皮下注射到动物的尾根部。在接下来的10天里,我们发现动物逐渐出现了症状。

(2)实验动物:我们同样使用了8-10周龄的C57BL/6小鼠,雌性。

①MOG35~55是EAE脱髓鞘病变过程中致敏抗体的主要目标,因此我们使用人工合成的MOG35~55肽片段来代表这个免疫显性区域。

②我们的免疫方法如下:我们将300μg的MOG35~55溶解在200μl的PBS液中,再与200μl的CFA混合。为了增强免疫效果,我们添加了结核杆菌,使其浓度为2mg/ml。我们使用电子搅拌棒进行搅拌,持续5-10分钟进行充分的乳化。我们注意检查是否乳化完全,如果乳剂落入水中不散开而是漂浮在水面,便说明乳化完全。

随后,我们将混合乳剂皮下注射到小鼠的双侧腹壁4点处。对照组则只注射PBS液和CFA混合后的乳剂。在免疫前24小时和免疫后24小时,我们均将100μl的百日咳菌液(含活菌2×109个)腹腔注射到小鼠体内。如果需要,我们将MOG35~55的剂量改为200μg,并腹腔注射400ng的百日咳毒素。免疫方法与前述相同。


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