1．动物模型制作 我们选用6只短尾猴，体重3～4kg(雌雄不拘)作为实验动物。首先需要制备S抗原，我们通过从人眼中获取视网膜提取物来提纯S抗原。具体的步骤为：①使用半饱和硫酸铵对视网膜提取物进行沉淀，②通过交联葡聚糖凝胶过滤来得到S抗原，③最后使用羟基磷灰石色谱层析进行吸附纯化。
为了诱导实验性主动免疫性葡萄膜炎(EAU)，我们使用100μg的S抗原免疫短尾猴。我们将可溶性S抗原0.5ml与0.5ml完全弗氏佐剂乳化，并将配置好的1ml视网膜S抗原分别于肩胛间5个区域皮下注射。在注射之前，我们使用裂隙灯、间接检眼镜、荧光血管造影(FFA)进行检查以确保实验动物无任何炎症表现，亦未发现视网膜血管遮盖物及荧光素渗漏。为使实验动物舒适，我们在注射前对其进行了氯胺酮(15～25mg／kg)肌内注射来达到麻醉效果。
2．观察指标及结果 我们每周对实验动物进行眼部裂隙灯以及间接检眼镜检查并指导血管造影检查。在主动免疫造模后5个月内，我们对6只实验动物进行持续观察。在近9个月的病程观察中，发现无论葡萄膜炎的程度轻重，实验动物在造模后1个月突然出现病情加重的现象，双眼并非同时发病，而是一眼在另一眼发病后1～5周发病。实验动物具体的体征包括视网膜血管(静脉及小静脉)遮盖物、视盘水肿、前部葡萄膜视网膜炎、视网膜下渗出、玻璃体炎以及偶发前部葡萄膜炎。通常最严重症状的发生在3只未预先光凝的猴子。
从上述结果可以看出，我们使用的葡萄膜炎模型均通过抗原诱导而获得，称为实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis，EAU)。这种疾病是一种器官特异性的CD4+ T细胞介导的眼内炎性疾病，是常用的研究人类内源性葡萄膜炎尤其是后部葡萄膜炎的疾病模型。我们使用的抗原包括超抗原(S2Ag)和感光器间受体树脂样结合蛋白(interphotoreceptor retinoid binding protein，IRBP)等。由于抗原主要来源于感光器细胞层，该细胞层自然成为EAU自身免疫反应攻击的主要对象。其炎症主要位于眼球后部，以后葡萄膜为主，除视网膜、脉络膜肉芽增生外，主要病变为视网膜血管炎和血管周围炎，严重者可发生视网膜剥脱。虽然鼠类EAU模型比其他啮齿类如大鼠的EAU模型更接近某些类型人类的葡萄膜炎，但在灵长类动物建立EAU模型则更为接近人类葡萄膜炎的自然病程。因此，我们建议读者根据自己的研究需要，选择适合自己课题的动物以及试剂来建立模型。
