恒河猴模型

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1.建模方法

本实验选取恒河猴作为研究对象,进行HEV Ⅳ型感染模型的建立。在实验前对研究对象进行常规医学观察,并检测血清总胆红素、ALT、AST以及血清、粪便中的HEV RNA检测,以筛选出结果均正常的雄雌恒河猴各1只,分别进行笼养。

接着,我们将急性感染HEV Ⅳ型患者急性期粪便提取液作为接种材料,按照0.6ml/kg的剂量静脉注射给恒河猴。接下来,我们每日观察实验动物的摄食及日常活动情况,每日采集新鲜粪便,在不同时间点(1、2、3、5、6、7、8、9、11、13周)取血及行肝组织穿刺,然后分离血清,送检血生化,冻存部分血清及粪便标本备用,用10%甲醛固定肝活检标本,石蜡包埋备用。血清样本用自动生化分析仪检测TBil、ALT、AST,用RT-PCR法检测血清及粪便标本HEV RNA,石蜡包埋肝组织标本作常规HE染色。

2.建模结果

通过实验,我们发现接种后第三周,两只恒河猴的血清中均检出了HEV RNA。其中,雄性猴持续阳性3周,雌性猴持续阳性4周。而在第32天和第40天,我们在它们的粪便中也检出了HEV RNA,持续阳性24天。值得注意的是,粪便中HEV RNA检出时间晚于血清HEV RNA检出时间5~10天,持续时间也稍长。

3.模型特点

通过恒河猴感染HEV Ⅳ型后的表现,我们可以看出其典型的急性肝炎特征。肝组织的水变性、嗜酸性变,肝小叶内点灶状坏死以及轻度碎屑样坏死,淋巴细胞的浸润等,均表明恒河猴已经出现了肝脏炎症。然而,在感染HEV Ⅳ型后的第13周,肝组织学损伤已经明显改善。因此,我们可以将该HEV Ⅳ型感染模型作为研究HEV感染病理生理特征、防治及疫苗研究等方面的实验手段。

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