免疫诱导法建立复发性口腔溃疡动物模型

复发性口腔溃疡是一种常见的口腔疾病,其病因复杂多样。但是,免疫系统异常被认为是复发性口腔溃疡的主要病因之一,因此免疫诱导动物模型成为了研究复发性口腔溃疡的重要手段之一。

为了建立复发性口腔溃疡动物模型,研究人员会进行免疫诱导法,其中常用的实验动物是健康的新西兰兔。 导入动物抗原或疫苗,来刺激免疫反应,其具体步骤如下:

1. 抗原制备

取4只健康新西兰兔,进行安乐死。取头部,在超净工作台内操作。首先在口腔颊部剪开,然后用灭菌生理盐水冲洗三次。之后注射生理盐水于口腔黏膜下,使用灭菌手术器械(手术剪和手术钳)剥离黏膜,最后将黏膜置于灭菌培养皿中,用灭菌生理盐水再次冲洗三次。随后将灭菌滤纸吸干水分并剪碎,称重后与10倍量的0.1 mol / L 磷酸缓冲液(PH7.4)混合。最后匀浆20分钟,离心15分钟。取上清液,测定蛋白含量为8.0mg/ml。

2. 乳化

取适量的口腔黏膜匀浆并融化后加入等量的完全弗氏佐剂,用注射器混合,形成乳状液。滴一滴于水面上,若保持在滴状不散开,则可应用。

3. 注射免疫

将实验用新西兰兔背部脱毛,常规消毒,无菌条件下按脊柱两侧皮内注射1毫升抗原乳化液,共20个点,每隔两周注射1次,共注射5次。一般在第3次注射后出现口腔病损。

该动物模型的特点在于,口腔溃疡在2-3天内愈合,然后会反复发作,更接近于临床情况。

该方法建立的复发性口腔溃疡动物模型更接近于临床。但这种方法的伤害程度较大,研究人员选择免疫动物的类型通常为新西兰兔,但也可以选用大鼠、豚鼠、小鼠或金黄地鼠。此模型适用于研究复发性口腔溃疡的病因及治疗、提高免疫功能的抗口腔溃疡药物研究、以及防治化疗过程中口腔溃疡药物研究等。需要指出的是,免疫诱导口腔溃疡动物模型适用于复发性口腔溃疡,不适用于单纯性口腔溃疡;如果研究的工作是关于炎症引起的口腔溃疡,豚鼠的创伤性口腔溃疡动物模型则较为适合。对于研究感染引起的口腔溃疡,则应该使用细菌感染诱导的口腔溃疡动物模型。

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