诱发性肝癌动物模型

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【肝癌动物模型的制备】肝癌动物模型是通过化学、物理或生物致癌因素作用于实验动物身体,模拟肝脏损伤、纤维化和恶性转化的过程,从而诱发动物形成肝癌。常用的致癌物质包括二乙基亚硝胺(DEN)、对二甲基氨基偶氮苯(DBA)、2-乙酸氨基酸(2-AAF)、亚氨基偶氮甲苯(OAT)和黄曲霉素(AF),其中以化学诱发为主。

【制备方法】

一、DEN诱导法:单用时将0.25%DEN水溶液按10mg/kg剂量灌胃大鼠,每周一次,同时每天以0.025%DEN水溶液供动物饮用,连续喂养6个月。也可采用腹腔注射一次性0.5%DEN的无菌水溶液(100mg/kg),1周后开始持续供给100mg/L的DEN无菌水溶液自由饮用,直至16周;其间第9~11周改供给无菌水。也可以联用2-AAF即Solt-Farber诱癌法:一次性给予大鼠腹腔注射200mg/kg DEN溶液,2周后喂养含0.02%2-AAF饲料14天,第3周行大部分肝切除,第4周恢复普通饲料喂养。

二、DBA诱导法:即用含有0.06%DAB饲料喂养,并控制维生素B2含量(≤1.5~2.0mg/kg),连续喂养4~6个月。

三、2-AAF诱导法:含有0.05%2-AAF的饲料供应Sprague Dawley大鼠连续3~4个月。

四、OAT诱导法:用含有1%OAT溶液(10mg/ml)涂抹在小鼠两肩胛间的皮肤上,隔日1次,每次2~3滴,连续7~8周。

五、AF诱导法:大鼠每月饲料中含0.001~0.015ppm的黄曲霉素,喂养6个月,也可以用二甲基亚砜(DMSO)溶解黄曲霉素,按每天400μg/kg腹腔注射1次,连续2周后停止注射,一次性再注射0.75~1.50mg/kg黄曲霉素,2周后行肝大部分切除术。

【模型特点】DEN是最常用的化学诱癌剂,可使大鼠诱发肝癌率达80%。DBA法6个月即可发生肝癌,诱癌率高达60%。2-AAF诱导3周即可出现癌前病变,镜下可见肝细胞呈卵圆形细胞增生,且具大小不等的癌巢结节,3~4个月后有80%~90%的动物产生肝肿瘤。OAT涂抹法给药8周后即可诱发结节,7个月左右即可诱发肝癌,诱癌率约为50%。AF诱导发生率为80%,但由于病程较长,肿瘤主要为弥漫结节型。

【模型评估和应用】肝癌动物模型的制备过程中动物的死亡率较高,肝癌病变的部位、数量和时间也存在个体差异。因此,该模型目前主要用于肝癌病因学、遗传学及生物学等方面的研究,以期更好地理解肝癌的发生、发展机制,为肝癌的防治提供科学依据。

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