大鼠剥夺性弱视模型

大鼠的视觉系统虽不如猴和猫那样接近人类,但仍有一定的立体视范围,其视觉发育较猫快2~3倍,2~8周龄为其视觉发育的敏感期。此外,大鼠价格便宜,容易饲养,动物的选择可以实现标准化从而减少误差,故大鼠是目前选用视觉发育研究最多的实验动物,特别是对于视觉中枢的研究则更为广泛。

在视觉发育研究中,大鼠的弱视模型是常用的实验模型之一。常见的选用大鼠品种有Wista大鼠和SD大鼠,一般选用2周龄大鼠。对于入选的大鼠应进行严格消毒,应用10%水合氯醛或者乙醚吸入麻醉,进行上、下眼睑睑缘1.5~2.0mm的剪切术,术后应严密缝合术眼以封闭术眼及防止感染,术后3d内给予青霉素10万U/kg腹腔注射以预防感染,1周内应每日消毒及检查创口,避免感染造成缝线脱落。在自然光线下饲养四周,但每日光照时间不少于12h。一个月后即可成功造成大鼠剥夺性弱视模型。

除了2周龄的大鼠,视觉剥夺手术在幼鼠出生后第3天也可以实施。

在四周后,所有造模大鼠都需要接受VEP检测以判定造模情况。此时,将造模大鼠形觉剥夺眼粘连的眼睑剪开,与正常组大鼠一起置于暗室内暗适应30min,按0.3ml/kg体重腹腔注射10%水合氯醛麻醉。接着,需要将双眼结膜囊内滴入美多丽眼液以充分散大瞳孔,再剪除大鼠前囟、双侧乳突和双侧头颅后极部对应视皮质部位处的体毛。将大鼠置于固定仪上,分别检测实验组大鼠形觉剥夺造模眼和未造模眼P-VEP。需要使用不透明黑色眼罩遮盖另一眼,将受检眼使视网膜中央对准中央视标,角膜顶点距视屏25cm。翻转棋盘方格图形,使用平均亮度50cd/m2,面积相当于视角120×120,空间频率0.16cpd,时间频率1Hz,对比度60%,带通0.5~100Hz,叠加100次,阻抗<2kΩ作为刺激。通过VEP检测,可以初步判定实验组大鼠是否患有弱视症状。

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