系统性红斑狼疮样小鼠模型

【操作步骤】无菌条件下,取出BALB/c鼠脾、淋巴结,分离出淋巴细胞。接下来,将淋巴细胞放入Hank's液中洗涤3次,加入0.5%锥蓝检查细胞活力,确保大于95%的存活率。然后,将细胞悬液调整至所需浓度。

接下来,将5×10的7次方BALB/c鼠淋巴细胞分别经由静脉途径输入未经照射过的同性别、同龄F1小鼠体内。隔周再输入一次。在小鼠输注之前,用细塑料管经过后眼眶静脉获取所需血量(每次约0.1ml),之后每两周采血1次,累计至16周。所有血清被离心分离后存放在-30℃,以用于后续测定。通过ELISA方法检测抗DNA抗体和抗组蛋白抗体。在输注淋巴细胞后的第16周,小鼠被放血处死,肾脏被取出进行组织学观察和免疫组化分析。

【结果分析】结果表明,同种异体淋巴细胞可以诱导宿主自身产生自身抗体。通过使用亲代BALB/c鼠淋巴细胞腹腔输注F1代鼠,可以诱导抗DNA抗体水平升高。实验组小鼠在第2周就出现了抗DNA抗体升高的情况,在第6周达到高峰,之后缓慢下降,持续异常至第12周,之后在第14周降至正常范围内。亲代BALB/c鼠淋巴细胞静脉输入F1代鼠,在第2周也出现了抗DNA抗体升高,第8周出现高峰,之后略有下降,但持续异常至第16周。肾组织学和免疫组化分析结果表明,第16周时,实验组鼠出现了肾小球和肾间质血管旁不同程度的单核细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润。肾小球基底膜增厚且厚薄不均,间质细胞增生。免疫组化结果表明,肾小球基底膜和毛细血管内皮区域有IgG细胞复合物沉积,呈颗粒状。该模型有助于阐明自身抗体产生的机制以及研究免疫反应范围基因和自身抗体的致病性等方面,具有广阔的研究应用前景。


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