小鼠乙型肝炎动物模型制备方法

造模方法:以6~8周龄的体重为14~18克的BALB/c小鼠为实验对象。采用高压水注射法,每只小鼠体内注入总体积为每克体重0.1ml的复方氯化钠溶液,并加入15μg pHBV1.3质粒,注射时间点分组,每组至少有3只小鼠。注射后在第1,2,3,4,7,10,15,20天通过眼眶采血,收集血清用于血清学检测。在第1,4,7,10,15,20天处死小鼠,并取部分肝组织用4%中性甲醛固定,其余肝组织用液氮冻存。用real-time PCR、ELISA、放射免疫分析、Southern blotting、Northern blotting,以及免疫组化等方法检测小鼠病毒血症、血清和肝组织中HBV抗原表达的动态变化、肝组织中HBV转录和复制情况以及小鼠免疫应答状况。

结果:实验结果显示,在小鼠体内注射1.3copy的HBV基因组后,可以表达和复制,并诱导小鼠产生特异性免疫应答。这种应答模式与人类HBV急性感染类似,并且与HBV清除过程相似。该模型可用于HBV病毒学、免疫学以及抗病毒药物筛选等方面的研究。这一研究结果有望为HBV感染的防控工作提供重要的科学支持。

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