成年鼠DFV感染模型

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(1)复制方法  提取自BALB/c小鼠的6-8周龄,初始感染使用1000TCID50/0.5ml (50%细胞培养感染浓度)的登革热病毒(DEN2)培养物,在小鼠腹部皮下注射多个点,每只小鼠注射0.5ml,每天一次,持续3天。在第16天再次感染,使用10的-2次方TCID50同样的方法进行感染。在感染后第一天即可检测到 在肝脏、淋巴结、脾等组织中存在病毒抗原颗粒,随后逐渐消失,仅在脾脏血窦中检测到有病毒感染。3-5天后,可以在小鼠血浆样本中分离出病毒。在感染后的8-9天,病毒可以在小鼠的肝脏、脾脏、肾脏和大脑组织中分离出;其中病毒在脑组织中的持续时间最长,再次感染后,病毒的分布特征与初次感染相似。

(2)模型特点  感染登革热病毒2天后,小鼠血清中即可检测到病毒,并且从此之后,病毒滴度逐渐升高,第6天达到峰值,小鼠出现病毒血症。 同时,感染小鼠的血小板和红细胞数量明显减少,第6天数量降至最低水平,从小鼠的血浆中可以检测出特异性IgM和IgG类抗体。感染后,模型动物血小板数量减少程度、病毒血症期长短及特异性抗体的产生动态均存在一定的差异。此外,在血清中的TNFα量的增加是导致BALB/c小鼠死亡的一个重要原因。

(3)比较医学  感染登革热病毒后,模型小鼠常出现弓背、耸毛、震颤、低热、血小板数量降低等类似恶性登革热的临床表现。初次感染后,只有部分动物表现出双相热型(典型登革热热型);而再次感染后,大部分小鼠出现双相热型。说明10周龄的BALB/c小鼠对DEN2感染具有良好的敏感性,感染症状与人类登革热感染类似。由于成年鼠具有正常的免疫功能,因此成年鼠DFV感染模型在研究登革热病毒感染中的免疫病理机制方面比DFV感染乳鼠模型更具有价值。

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