化学物质引起癫癎模型

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许多化学物质在大剂量应用时可诱发动物产生惊厥。据研究,除了已经提到的3-巯基丙酸、荷包牡丹碱、喹啉酸和海人草酸,还有其他物质也可以诱发癫痫发作。例如,阿托品、氯化钠、H-85等。

1. 3-巯基丙酸引起癫癎模型(Model of epilepsy induced with 3-mercaptopropionic acid)

(1)复制方法  选用健康的雄性小鼠,体重在22-24g之间。按照每个小鼠体重为60mg/kg的剂量于皮下注射3-MP。注射后,动物的兴奋性明显增强,表现为活动增加,出现背弓、跳跃和奔跑。接下来是短暂的间歇期,当动物伏地而卧、呼吸急促、头面部呈呆滞状时,这个阶段就开始了。之后动物会很快进入二次发作,全身阵挛,因肢体阵挛体位平衡不能保持而倒地,最后大部分动物在全身强直性癫癎发作后死亡。实验中记录动物发作的潜伏期、阵挛性发作出现的时间、死亡时间、阵挛性和强直性癫癎的发生率和死亡率。实验观察时间为30min。

(2)模型特点与比较医学  3-MP的致痉原理是抑制了GABA的合成,使脑内GABA能神经的抑制功能降低所致。因此,能对抗由3-MP引起的癫癎的抗癫癎药,其作用机制之一可能是通过GABA系统发挥作用。3-MP诱发的癫痫潜伏期短,发作类型属于大发作。在实验性癫痫的研究中,3-MP是一个有用的工具药。与印防己毒素、戊四唑、士的宁等诱发的癫痫模型相比,3-MP具有更优秀的效果。

2. 荷包牡丹碱诱发的实验性癫痢模型(Model of epilepsy induced with bicuculline)

(1)复制方法  选用健康的雄性小鼠,体重在22-24g之间。按照每个小鼠体重为2.7mg/kg的剂量于皮下注射荷包牡丹碱。注射后,癫痫发作的潜伏期约为10min,开始为行进间竖尾,跳跃,继之出现前肢抬起,搔抓样运动,随后出现阵挛性癫痫,并因此而倒地。倒地后,小鼠保持原有姿势1-2min,再次发作时,以剧烈奔跑开始,接着出现阵挛强直性癫痫,随后动物很快死亡。

(2)模型特点与注意事项  荷包牡丹碱是GABA受体的拮抗剂,同样也是降低了GABA能神经的抑制功能而诱发惊厥。因此,这种方法造模操作简便,癫痫症状典型,实验结果稳定。荷包牡丹碱溶于水后,极易被破坏,实验时必须新鲜配制,配制后溶液置于0℃保存,在3小时内使用。

3. 喹啉酸诱发的实验性癫痫模型(Model of epilepsy induced with quinolinic acid)

(1)复制方法  选用健康的雄性小鼠,体重在22-26g之间。选用0.7mm的注射针头,在脑室内注射喹啉酸(注射点:前囟后2mm,矢状缝旁开1.5mm,深度2mm),以恒速注射(10μg/(10μl·min),pH为7.4)。注射后约1min左右出现阵挛性发作,发生率为95%,其中约半数动物过渡到强直性发作,动物随后死亡。

(2)模型特点和注意事项  喹啉酸是色胺酸在体内的代谢产物,为一种内源性的兴奋性氨基酸,对NMDA受体有强烈的激动作用,并可促进谷氨酸和天门冬氨酸的释放,从而诱发实验性癫痫发作。为了确保结果的可靠性,实验结束后每只小鼠都需经过原给药孔注射墨水,以确定脑室给药部位是否正确。实验过程中,注意头部固定器对小鼠呼吸的影响,固定后呼吸自然平稳方可进行实验。

(3)比较医学  三唑仑对上述指标均有很强的对抗作用,苯妥英钠和苯巴比妥不能降低阵挛性发作的发生率,但对其他指标都有保护作用。

4. 海人草酸诱发的实验性癫痫模型(Model of epilepsy induced with kainic acid)

(1)复制方法  选用健康的雄性小鼠,体重在22-24g之间。小鼠脑室注射海人草酸0.02μg/(10μl·min),pH为7.4,注射方法和注意事项同喹啉酸。给药后动物很快出现典型的实验性癫痫。出现奔跑、前肢抬起、头部震颤、四肢阵挛性癫痫发作,并因不能平衡而倒地。记录惊厥的发生率,观察时间为30min。

(2)模型特点和比较医学  海

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