犬脑血管痉挛模型

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(1)模型制作方法

本实验采用实验犬,体重为15~25kg。首先使用戊巴比妥钠麻醉,剪除颈部毛发,局部皮肤消毒,然后进行正中切口。在环枕关节处,对双侧颈总动脉及所有分支进行广泛彻底结扎,在甲状腺下极约2cm处,再次结扎离断双侧颈总动脉。

在犬左侧卧位的情况下,通过枕大池穿刺放出5ml脑脊液。再缓慢注入自体未肝素化动脉血6ml于枕大池内。48小时后,取自体股动脉血10ml,分离血红蛋白。然后取血红蛋白3ml,与含50U凝血酶的自体动脉血2ml混合。再次穿刺枕大池,首先放出脑脊液4ml,随后缓慢注入血红蛋白与自体动脉血的混合液5ml。

为了评估药物效果,采用脑电监护仪采用单极导联记录双侧额、颞、顶和枕部生物电活动。评定标准包括Ⅰ.β活动减少;Ⅱ.θ和σ活动增加;Ⅲ.正常a节律消失;Ⅳ.全脑波幅降低。此外,神经症分级采用Growell RM标准,血管造影采用Liscazak标准。

(2)模型特点

颈部血管结扎后3~4天,基底动脉代偿性扩张。当SAH发生在5~7天,血管会发生痉挛,基底动脉平均收缩约50%,脑电均有明显变化,且饮食量呈现不同程度的减少。此方法制作的犬症状性CVS模型较为稳定,且具有价廉、易得和便于实验研究的特点。

(3)比较医学与注意事项

与兔子不同,犬颅内外交通更发达。如果颅内外交通支时间太长,血液就会外流到动脉周围。因此,颈部血管结扎与注血间隔时间以3~4天为宜。

在颈部血管结扎的过程中,必须进行彻底广泛的操作,同时行颈动脉窦切除。用95%医用乙醇对窦周围减压神经末梢涂抹数次,这样,90%的犬可预防反射性血压升高。

如果在第二次枕大池注血后仍不出现症状性CVS,可以考虑进行第三次注血红蛋白混合液。注血法致CVS模型发生关键在于实验动脉周围能否形成持续性积血。因此,在枕大池注血后,应早期将头置于头低尾高位30分钟,同时局部应用凝血物质,并重复注血,使注入的血液不致很快扩散。

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