(1)复制方法 为了制备大肠杆菌(O111B4)的100000000/ml和1000000/ml浓度菌液，我们采用了倾斜平板法。在使用前，我们测量了集落形成单位(CFU)值来确定菌液的浓度。接下来，我们使用了体重在200g左右的雄性大鼠进行实验。在术前，大鼠常规禁水24小时并用细线扎住阴茎。在乙醚吸入麻醉下，将动物仰卧固定在手术板上，消毒下腹部皮肤并切开，暴露出左侧输尿管和膀胱，在输尿管中段穿刺暂不结扎。然后使用注射器注入100000000/ml的菌液到膀胱内，每只注射约0.5ml左右，并将动物恢复到正常饮食和饮水。术后24小时，我们采用适度松紧结扎侧腹部黑线，并在术后第7天，通过肾功能和血生化指标测定来分别测试大鼠的肾功能。我们还通过取两侧的肾脏，一半组织经固定液固定，作常规组织切片，并另一半组织匀浆后作细菌培养等方法来进行实验。
(2)模型特点 实验结果显示，我们的动物模型具有肾盂、肾盏系统受累表现的特征。术后90天，大鼠均表现出尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)/尿肌酐明显升高的症状，而术后24小时的尿蛋白定量并没有明显增加。在30、60、90天的检测中，血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)都没有明显升高。术后第7天时，模型动物的膀胱尿标本及左肾组织细菌培养为阳性，菌落为不透明红色圆形，不透明灰白色圆形等。在60天内，细菌培养高阳性率可持续保持；肉眼观察也显示出肾脏肿胀以及部分已融合成片的脓肿等症状。镜下病理学观察也证实了肾盂肾炎的存在，其中病变急性期左肾盂黏膜上皮细胞坏死、脱落，腔内积脓，肾实质弥漫性化脓灶，小管腔内可见白细胞管型等症状。这些观察结果与慢性肾盂肾炎(CPN)的病理改变类似，说明我们的动物模型是成功建立的。
(3)比较医学 肾盂肾炎被认为是临床肾脏疾病中最常见的感染性疾病，根据病程可分为急性肾盂肾炎(acute pyelonephritis, APN)和慢性肾盂肾炎(chronic pyelonephritis, CPN)。临床上APN可以使用大量抗生素进行治疗，但是，如果治疗不当也可发展为CPN，抗生素对CPN的疗效很差，很难治愈，且反复发作，预后不好，因此APN转为CPN及CPN阶段的病理损伤机制是急需解决的问题。因此，我们建立与临床CPN相似的动物模型是十分重要的。我们的动物模型具备特征性肾盂、肾盏系统受累表现，即肾脏有局灶性粗糙的皮质瘢痕，并有相关肾乳头收缩和肾盏的扩张变钝。此外，本模型不会出现肾功能减退及大量蛋白尿，符合临床上常见的肾功能正常的CPN。我们采用了双因素方法制作了这个动物模型，即联合短暂结扎单侧输尿管和膀胱内接种细菌，这种方法可以造成结扎侧肾脏的特征性变化，同时也可以评价肾小管损伤指标之一的尿NAG/尿肌酐比值。这个实验模型是研究CPN发病机制及药物治疗方面的有价值的工具。
