乙醇诱发的肝纤维化模型

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(1)复制方法:在成年大鼠身上进行实验,采用灌胃给白酒(ψ(C2H5OH)=0.56)7g/kg体重、每日晨1次,连续24周的方法进行造模。也可以采用灌胃给白酒-玉米油-吡唑混合液的方法,每日晨1次,连续12周。混合液中各组分摄入量比例是:每日白酒[ψ(C2H5OH)=0.56]8~12/kg体重,玉米油2g/kg体重,吡唑24mg/kg体重,另外间断给予高脂饲料。在造模过程中,每日观察动物一般状况及体重的经时变化,造模毕,抽取全血制备血清作血清生化检测,摘取肝脏称其湿重,换算成脏器系数,并作组织形态学检查。

(2)模型特点:采用单纯白酒灌胃的方法制造模型时,动物会出现流涎、体态呆板、嗜睡、精神萎靡、食欲减退和行动迟缓等现象,血清天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)含量升高,总蛋白(TP)和球蛋白(GP)含量下降,部分大鼠肝组织中相邻肝小叶的中央区-汇管区出现桥接坏死,坏死区内可见大量炎细胞浸润,以中性粒细胞为主,表现为中-重度炎症变化。造模12周时,动物会出现毛发光泽变少、体重增长缓慢、经常溏泻、肝脏体积变大、色泽暗淡、质地偏硬,大部分动物肝组织出现不同程度的水样变性及气球样变性,以肝包膜下的肝细胞为明显,且肝细胞脂肪变性加重,脂滴增多。造模24周时,动物血清AST继续维持在较高水平,ALP从高位恢复至正常范围,白蛋白(ALB)含量显著下降。在肝门管区的小动脉、静脉、肝小叶中央静脉、肝窦处可见血液淤滞,中央静脉内出现透明血栓,部分中央静脉扩张,基底膜增厚,血管内皮细胞及窦内皮细胞肿胀,胶原纤维沿窦壁沉积,呈铁丝网格状或龟壳样,范围较广,汇管区及其周围亦可见到。严重者中央静脉及汇管区胶原纤维增粗,小叶内出现纤维分隔,但小叶结构正常,界板完整。采用白酒-玉米油-吡唑混合液灌胃的方法制造模型时,动物会呈现四肢瘫软、酣睡的醉酒状态,且皮毛疏松、精神不振、大便有时松散不成形,饮食逐渐减少,体重后期下降。造模12周,模型动物肝脏质色变暗、边缘变钝、表面凹凸不平、部分有白色点状凸起,肝细胞变性坏死比较明显,呈脂肪变性、水样变性和气球样变性,局部中性粒细胞及少数淋巴细胞浸润,肝终末静脉周围、汇管区及汇管区周围呈轻-中度纤维化,其中窦周纤维化比较明显,轻度者可见窦壁网状纤维增粗变直,插入肝细胞之间,甚至包绕一个或几个肝细胞,但小叶结构保留,中度者可见胶原纤维沿窦周沉积,环绕肝细胞呈网格状或龟壳样,范围多较广泛。

(3)比较医学:乙醇与肝纤维化发生关系密切。乙醇自从胃肠道被吸收后,经机体酶系氧化生成乙醛,后者是乙醇的主要代谢产物,并可继续被氧化成乙酸盐。乙醛对肝脏及其他脏器具有毒性作用,乙醇转变成乙醛及乙醛转变成乙酸盐或乙酰辅酶A(NAD)的过程中还可产生还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。而NAB/NADH比例下降使肝内三羧酸循环受抑、糖异生作用减弱以及脂肪酸合成增加,当其增多超过肝脏的处理能力就形成脂肪肝,最终形成肝纤维化。采用在喂饲固体饲料的同时给大鼠胃内连续24周灌入乙醇的方法,可以复制可在不同时期观察动物一般行为活动、血清生化指标和组

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