大鼠冷冻伤血管源性脑水肿模型

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本文介绍了一种制作脑水肿动物模型的方法,用于研究脑水肿的发病机理和治疗方法。

1.材料和器械:本实验使用体重为200~230g的Wistar大鼠,戊巴比妥药物以及小口径液氮冷冻器。

2.制作方法:首先用1%戊巴比妥(45mg/kg)腹腔麻醉,待动物失去角膜及翻正反射后,在立体定位仪上将动物的头部固定。然后切开头皮,分离骨膜,暴露左顶颅骨。接着将冷冻器放入液氮中预冷,使温度达到液氮温度(-196℃)。冻伤头直径为5mm,垂直于头盖骨的矢状缝左侧开5.5mm处放置冷冻器,压力为108g,冷冻60s。该操作会导致左侧顶叶脑皮层的冷冻伤,造成脑水肿。手术室温度为25℃,维持动物体温为37~37.5℃。术后大鼠可以自由进食饮水。

3.模型原理:所制造的模型主要通过脑的冷冻伤引起脑水肿。

4.模型后变化:实验结果显示,冻伤后2h,伤侧脑组织含水量显著升高,水肿程度逐渐加重至24h最高。HE染色光镜下观察,冻伤后2h左侧大脑皮质神经元变性明显,6h和24h更为严重,坏死消失、液化、中性粒细胞渗出,小胶质细胞聚集。坏死区周围水肿明显,白质神经纤维间隙扩大,可见粉红色水肿液。而假手术组大脑皮质神经元结构清晰,未见异常。电镜下观察,冻伤脑组织内皮细胞肿胀,质膜吞饮小泡含量明显增加,星形胶质细胞终足肿胀,髓鞘紊乱,血管周围间隙增宽,毛细血管内有炎细胞浸润。而假手术组超微形态未见异常。

5.注意事项:在制作模型的过程中,应当使用立体定位仪固定大鼠。在冷冻的过程中,使用一般的手术台易导致呼吸道不畅,从而影响模型的稳定性和可比性。而立体定位仪可以使顶骨更平整,利于冷冻头与颅骨良好接触,同时可以减少外界温度的影响。冷冻头对颅骨的压力也会影响血管源性脑水肿的程度,本实验采用恒定的压力为108g。

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