记忆障碍动物模型的建立方法
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回避性条件反射方法是现代医学领域中广泛采用的一种方法。通过该方法,动物经一次训练后即可学习逃避电,并且很快达到巩固状态,长时间内保持警惕。若采用这种方法观察药物对改善记忆的作用,即使待测试的药物具有很好的效果,也可能因处理组差异甚小而不能通过统计学检验。因此,我们采用记忆缺失的动物模型来评估药物的作用,并初步分析药物的作用机制。
形成记忆障碍的方法有很多种,主要包括:电休克、脑部缺血、缺氧、某些化学药品、应激、剥夺睡眠、老年动物和有遗传缺陷的动物。针对不同的实验目的,我们可以选择相应的记忆缺失动物模型进行研究。
下面分别介绍记忆获得、记忆巩固和记忆再现缺失动物模型的形成方法:
(1) 记忆获得障碍:由于抗胆碱药物的作用机制比较清楚、易重复,且作用具有一定的特异性,因此我们主要采用此类药物作为记忆获得障碍模型的研究工具。最常用的药物是东蓑若碱和樟柳碱,通常以3U min或10min ip的方式给药,剂量为1-5mg/kg。此时,动物的学习和记忆获得能力会受到显著的破坏。此外,像利血平、戊巴比妥钠、氯丙嗦、利眠宁等中枢抑制剂也能明显地阻止记忆的获得。
(2) 记忆巩固障碍:破坏记忆巩固的方法多种多样,其中常用的方法包括:
①电休克:在动物训练结束后立即将电极直接接触到其头部和鼻部,发送一定强度(通常为7mA)的电流持续1秒钟。24小时后,再次进行测验,这时候动物的记忆就不能得到保持了。
②缺氧:训练结束后立即将小鼠置于密闭的容器中,通入96.2% 的氮气和3.8% 的氧气混合气体,直到动物倒地且丧失意识。此外,还可以给动物吸入纯二氧化碳或皮下注射120mg/kg NaNO2,这样可以引起脑部缺氧,从而破坏记忆的保持。
③蛋白质合成抑制剂:环己酞亚胺、氯霉素、茴香霉素等都是常用的蛋白质合成抑制剂。其中,环己酞亚胺的作用容易重复,结果可靠。通常在训练后立即或在训练前10分钟以1次ip的方式给予120mg/kg剂量,就可以破坏记忆的巩固。
(3) 记忆再现缺失:经训练后,将小鼠向体重的20% -40%的酒精注射0.1ml/10g,即可明显干扰记忆的再现。酒精价格低廉,易于获得,而且结果稳定,容易重复,但它对记忆的确切影响机制尚未完全了解。
在上述方法中,通过使用化学药品来形成记忆障碍模型具有以下几个优点:① 操作简便,适用于大规模的实验或筛选试验;② 可根据需要采用不同
北检院部分仪器展示