角膜新生血管动物模型

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角膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是一种常见的眼部疾患,通常会导致角膜透明度的降低,是致盲的一个重要原因,且也是角膜移植术后发生排斥反应的高危因素。目前CNV的治疗仍是最棘手的问题之一。为了更好地研究CNV,科学家们通过一系列的方法制造CNV动物模型。其中,角膜囊袋法是最常用的CNV制造方法之一。

角膜囊袋鉴定法通常通过物理、化学和生物等方法,以及手术等方式来诱发动物的角膜新生血管增生,从而制造出类似于人类疾病的模型。常见的诱导剂有内毒素、碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子等。在角膜囊袋鉴定法中,缓释内毒素聚合物药丸和bFGF缓释药丸是两种常用的制造方法。

内毒素诱生的CNV是继发于炎症反应的一种现象,炎症刺激反应与新生血管的诱生呈正相关关系。因此,内毒素诱生新生血管可能受巨噬细胞分泌的bFGF因子调控,同时还受到其他因子的调节。而bFGF是一种具有多种功能的单链肽,在许多体外实验中被证实具有对血管内皮细胞分化、增殖、迁移和趋化的作用。事实上,bFGF还可以帮助产生微血管内皮细胞,这些细胞可以分泌大量的μ-PA,而μ-PA是血管生成早期的中心作用因子,他将纤维蛋白溶酶原转化成具有酶活性的纤维蛋白溶酶,最终促进新生血管的形成。

缓释内毒素聚合物药丸和bFGF缓释药丸都是制造CNV动物模型的有效方法。在缓释内毒素聚合物药丸方法中,通常使用高纯度的己醛对乙烯-醋酸-乙烯脂聚合物进行清洗,将聚合物溶解于二氯甲烷,并将内毒素与聚合物混合并均匀悬浮。而在bFGF缓释药丸方法中,则将缓释剂和一定量的bFGF混合,再加入硫糖铝,制成Hydron包裹的bFGF-sucralfate缓释药丸。

角膜囊袋制作是制造CNV的关键步骤之一,所有的手术步骤都必须在无菌条件下进行。在该方法中,乙烯-醋酸-乙烯脂聚合物会被切成一定大小的珠子,再将其溶解于二氯甲烷中。通过在角膜中央切口并向6点位潜行分离1/2厚角膜囊袋的方式,将制好的缓释药丸植入囊袋,然后再复位以便愈合。

制造CNV动物模型的优点在于:能够有效地促进新生血管的生长,且通过计算机图像分析系统,能够对新生血管进行每日连续动态定量测定,以便更好地进行疗效评价。而在bFGF缓释药丸制造的方法中,bFGF能够直接作为新生血管的刺激因子,排除其他间接因素的干扰,对于特定的新生血管抑制剂的疗效评价有重要意义。此外,他还具有稳定性和重复性好、经济实用等优点。

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